天天干亚洲_99久久免费国_亚洲国产精品成人久久久软件_亚洲成av人**亚洲成av**_精品中文字幕在线AⅤ_男女真实毛片视频图片

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 膠原酶的類型和應用及其組織解離方法介紹

膠原酶的類型和應用及其組織解離方法介紹

瀏覽次數:1600 發布日期:2024-7-5  來源:MedChemExpress (MCE)
 

膠原酶 (Collagenase),化學名為膠原蛋白水解酶,是從溶組織梭菌芽孢桿菌提取制備而成,能夠特異性識別膠原蛋白中的 Pro-X-Gly-Pro 序列,并切割該序列中的中性氨基酸 (X) 和甘氨酸 (Gly) 之間的肽鍵,常用于原代細胞制備[1][2]。不同類型膠原酶的應用為大家整理在下面啦~

表 1. 膠原酶的類型及應用。  







 


圖 1. 從固體組織制備單細胞懸浮液的關鍵步驟[3]

 膠原酶配制

向 100 mg 膠原酶中加入 4.5 mL HBSS,震蕩使其充分溶解, 0.22 μm 濾膜過濾除菌后,立即使用或分裝成小份量,于 -20°C 避光凍存,使用前在冰上解凍,避免反復凍融[4]

 組織分離

1、從生物體中解剖組織后,使用培養基/PBS/HBSS 清洗組織,隨后用無菌手術刀或剪刀將組織切成小的組織塊,HBSS 洗滌組織塊[5][6]

2、加入足量 HBSS,使其浸沒組織塊,并加入膠原酶至需要的工作濃度,于 37℃ 孵育。

表 2. 不同組織樣本解離方案。


3、已分散開的細胞可使用細胞過濾器/尼龍網篩得,收集備用。

4、使用不含膠原酶的 HBSS 或培養基洗滌收集的細胞數次。

5、預冷的細胞培養液重懸細胞[13]

 實驗技巧

 

MCE 除了膠原酶外,還提供如胰酶、分散酶、重組胰酶消化液等,均可應用于細胞消化及組織解離。 








[1] Zhewen Hu,et al. Novel strategy for primary epithelial cell isolation: Combination of hyaluronidase and collagenase I.Cell Prolif. 2023 Jan;56(1):e13320.

[2] Meital Charni-Natan,et al. Protocol for Primary Mouse Hepatocyte Isolation.STAR Protoc. 2020 Aug 13;1(2):100086.

[3] Andrew Reichard,et al.Best Practices for Preparing a Single Cell Suspension from Solid Tissues for Flow Cytometry. Cytometry A. 2019 Feb;95(2):219-226.

[4] Manouela V. Valtcheva,et al. Surgical extraction of human dorsal root ganglia from organ donors and preparation of primary sensory neuron cultures. Nat Protoc. 2016 October ; 11(10): 1877-1888.

[5] Hussein Shoaito,et al. The Role of Peroxisome Proliferator–Activated Receptor Gamma (PPARγ) in Mono(2-ethylhexyl) Phthalate (MEHP)-Mediated Cytotrophoblast Differentiation.Environ Health Perspect. 2019 Feb;127(2):27003.

[6] Zhewen Hu,et al. Novel strategy for primary epithelial cell isolation: Combination of hyaluronidase and collagenase I. Cell Prolif. 2023 Jan;56(1):e13320.

[7] Anna A. Nushtaeva ,et al. Establishment of primary human breast cancer cell lines using “pulsed hypoxia” method and development of metastatic tumor model in immunodeficient mice. Cancer Cell International volume 19, Article number: 46 (2019).

[8] Chaojun Tang ,et al. CLEC-2-dependent platelet subendothelial accumulation by flow disturbance contributes to atherogenesis in mice.Theranostics. 2021 Oct 3;11(20):9791-9804.

[9] Miguel F. Diaz ,et al. Bone marrow stromal cell therapy improves survival after radiation injury but does not restore endogenous hematopoiesis.Scientific Reports. (2020) 10:22211

[10] Nan Mei ,et al. The genotoxicity of acrylamide and glycidamide in big blue rats.Toxicol Sci. 2010 Jun;115(2):412-21.

[11] Chenwei Li ,et al. Identification of Pancreatic Cancer Stem Cells.Cancer Res (2007) 67 (3): 1030-1037.

[12] Suzanne Bertera ,et al. Human Hemangioblast-Derived Mesenchymal Stem Cells Promote Islet Engraftment in a Minimal Islet Mass Transplantation Model in Mice.Front. Med. 8:660877.

[13] Akihito Harusato,et al. Macrophage Isolation from the Mouse Small and Large Intestine.Methods Mol Biol. 2016:1422:171-80. 

發布者:上海皓元生物醫藥科技有限公司
聯系電話:021-58955995
E-mail:sales@medchemexpress.cn

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 91人妻人人澡人人爽人人精品 | 97无码免费人妻超级碰碰夜夜 | 亚洲欧美日韩精品一区 | 精品国产一区二区三区四区在线观看 | 国产a区| 97婷婷狠狠成为人免费视频 | 91人人妻人人做人人爽京东 | 免费一级做a爰片久久毛片潮喷 | 欧美日韩精品一区二区天天拍 | 久久二三区 | 美女视频黄频大全视频网站 | 久久成人免费观看 | 亚洲视频无码高清在线 | 国产精品视频久久久久 | 亚洲精品国产综合区久久久久久久 | 久久久无码人妻精品一区二区三区 | 久久久久久久久久久国产精品 | 五月天狠狠操 | 日本熟妇高清一区二区三区 | 国产欧美久久一区二区三区 | 国产精品久久久久久久久粉嫩 | 国产精品亚洲一区二区三区久久 | 99c视频色欲在线 | 成人精品视频在线观看不卡 | 亚洲一区二区三区 | 亚洲日韩欧美在线一区二区 | 97午夜理论片在线影院 | 黄色网在线播放 | 日韩精品一区二区三区费 | 99精品国产高清一区二区三区香蕉 | AV激情亚洲男人的天堂国语 | 亚洲乱码av一区二区 | 又爽又黄又无遮挡的在线观看 | 色天天爱天天狠天天透 | 婷婷中文 | 久久久er热这里只有精品2 | 日韩一区二区三区视频 | AV不卡在线永久免费观看 | 国产欧美另类精品久久久 | 欧美日韩黄色一区二区 | 久久精品99国产精品亚洲最刺激 |