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無錫菩禾生物是一家專業提供生物醫藥技術服務和細胞整體解決方案的高科技企業。擁有CMA 質量體系認證的實驗室，5大技術平臺（細胞平臺、分子平臺、免疫平臺、病理平臺、動物平臺）
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一、免疫共沉淀( Co-mmunoprecipitation, Co-IP )
1.1Co-IP :是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學原理來研究蛋白質相互作用的經典實驗方法,它可以確定兩種蛋白在完整細胞內生理條件下是否存在相互作用。
1.2免疫共沉淀(CoIP )實驗步驟
1.試劑準備,樣品收集
2.免疫沉淀反應后,在進行電泳
3.通過免疫共沉淀確定結合蛋白
二、免疫印跡immunoblotting
2.1免疫印跡immunoblotting:蛋白質印跡western blot，它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。Western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。Western blot常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。
2.2蛋白質印跡western blot實驗步驟
1.蛋白提取和定量（如果提供蛋白樣品，則直接電泳預實驗檢測抗體特異性）；
2.SDS-PAGE 10-15% 變性聚丙*酰胺凝膠電泳；
3.轉膜（PVDF膜）；
4.封閉 （5%脫脂奶粉）；
5.一抗孵育（其中內參基因為Tubulin或HistoneH3.1）；
6.二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成實驗無法繼續，則收相關預實驗費用）；
7.顯色（ECL）；
8.曝光、洗片、灰度分析；
三、ChIP(Chromatin immunoprecipitation)染色質免疫共沉淀
3.1染色質免疫共沉淀：技術主要應用于驗證及探尋體內環境中，蛋白質和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白質在DNA上的特定結合序列，常在研究轉錄調控以及組蛋白修飾中被應用到。
3.2ChIP實驗步驟
1.樣品準備
2.細胞固定
3.超聲打碎
4.免疫沉淀
5.洗滌
6.DNA純化
四、免疫組化(熒光）
4.1兔疫熒光:又稱為熒光抗體技術,將熒光標記技術和免疫學方法結合起來,利用抗原抗體相互作用從而對組織或細胞內的抗原或抗體 物質進行定位、示蹤定性以及相對定量等。
4.2石蠟切片兔疫熒光實驗步驟
1.烘箱內進行烘片,然后將切片進行常規脫蠟至水;
2.抗原修復:使用水浴鍋或電爐煮沸熱修復,或者中檔微波修復,緩沖液為0 01M檸檬酸鈉緩)沖液(pH6.0) ;
五、菩禾生物所有服務項目：
六、實驗服務流程
無錫菩禾生物是一家專業提供生物醫藥技術服務和細胞整體解決方案的高科技企業。擁有CMA 質量體系認證的實驗室，5大技術平臺（細胞平臺、分子平臺、免疫平臺、病理平臺、動物平臺），以專業、嚴謹、求真、高效服務理念，為全國科研工作者提供一站式技術檢測服務。
公司地址：江蘇省江陰市砂山路85號
聯系方式：0510-81608116
1.1Co-IP :是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學原理來研究蛋白質相互作用的經典實驗方法,它可以確定兩種蛋白在完整細胞內生理條件下是否存在相互作用。
1.2免疫共沉淀(CoIP )實驗步驟
1.試劑準備,樣品收集
2.免疫沉淀反應后,在進行電泳
3.通過免疫共沉淀確定結合蛋白
二、免疫印跡immunoblotting
2.1免疫印跡immunoblotting:蛋白質印跡western blot，它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。Western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。Western blot常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。
2.2蛋白質印跡western blot實驗步驟
1.蛋白提取和定量（如果提供蛋白樣品，則直接電泳預實驗檢測抗體特異性）；
2.SDS-PAGE 10-15% 變性聚丙*酰胺凝膠電泳；
3.轉膜（PVDF膜）；
4.封閉 （5%脫脂奶粉）；
5.一抗孵育（其中內參基因為Tubulin或HistoneH3.1）；
6.二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成實驗無法繼續，則收相關預實驗費用）；
7.顯色（ECL）；
8.曝光、洗片、灰度分析；
三、ChIP(Chromatin immunoprecipitation)染色質免疫共沉淀
3.1染色質免疫共沉淀：技術主要應用于驗證及探尋體內環境中，蛋白質和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白質在DNA上的特定結合序列，常在研究轉錄調控以及組蛋白修飾中被應用到。
3.2ChIP實驗步驟
1.樣品準備
2.細胞固定
3.超聲打碎
4.免疫沉淀
5.洗滌
6.DNA純化
四、免疫組化(熒光）
4.1兔疫熒光:又稱為熒光抗體技術,將熒光標記技術和免疫學方法結合起來,利用抗原抗體相互作用從而對組織或細胞內的抗原或抗體 物質進行定位、示蹤定性以及相對定量等。
4.2石蠟切片兔疫熒光實驗步驟
1.烘箱內進行烘片,然后將切片進行常規脫蠟至水;
2.抗原修復:使用水浴鍋或電爐煮沸熱修復,或者中檔微波修復,緩沖液為0 01M檸檬酸鈉緩)沖液(pH6.0) ;
五、菩禾生物所有服務項目：
| 細胞平臺 | 行為學檢測 | 動物模型 |
| 原代細胞制備與培養 | 水迷宮檢測 | 慢性胰腺炎模型 |
| 細胞培養、傳代 | 十字架 | 肝纖維化模型 |
| 原代細胞傳代培養 | 非酒精性脂肪肝 | |
| 細胞系STR鑒定服務 | 動物模型 | 骨質疏松模型 |
| 細胞轉染 | 小/大鼠飼養 | 糖尿病模型 |
| MTT細胞增殖、活性、毒性檢測 | 小/大鼠灌胃 | 眼外傷模型 |
| CCK8細胞增殖、活性、毒性檢測 | 兔子飼養費 | 青光眼模型 |
| 流式細胞凋亡檢測 | 大鼠灌胃 | 燒燙傷模型 |
| 流式細胞周期檢測 | 小鼠灌胃 | 短腸模型 |
| 血管形成實驗（非鈣染/鈣染） | 兔子灌胃 | 腎衰模型 |
| ROS檢測 | 腹腔/肌肉給藥（大小鼠） | 腎炎模型 |
| 劃痕實驗 | 腹腔/肌肉給藥（兔子） | 尿路結石 |
| 克隆形成實驗 | 尿液/糞便采集 | 高氧/低氧損傷模型 |
| 粘附實驗 | 血液采集 | |
| transwell實驗（遷移） | TTC染色 | 病理平臺 |
| transwell實驗（侵襲） | 超聲檢測 | 組織包埋 |
| 貼壁/懸浮細胞轉細胞株構建 | 血常規檢測 | 冰凍/石蠟切片 |
| 耐藥細胞株篩選構建 | DR檢測 | HE染色 |
| 骨組織切片 | 其他特殊染色 | |
| 分子平臺 | microCT | 全掃描拍照 |
| 載體構建 | 皮下瘤模型 | 掃描電鏡 |
| 細胞/組織/血液RNA提取 | 移植瘤模型 | 透射電鏡 |
| mRNA/miRNA等引物設計 | 原位瘤模型 | 共聚焦拍照 |
| RT-qPCR檢測 | 心肌缺血再灌注模型 | |
| CHIP檢測 | 門靜脈高壓動物模型 | |
| EMSA檢測 | 高血壓動物模型 | |
| 雙熒光素酶實驗 | 心肌梗死動物模型 | |
| 原位雜交 | 動脈粥樣硬化動物模型 | |
| 腦缺血再灌注 | ||
| 免疫平臺 | 腎性高血壓模型 | |
| 蛋白（核/膜/總）提取 | 主動脈弓狹窄模型 | |
| 蛋白含量測定 | 脊髓損傷模型 | |
| Western Blot檢測 | 背根神經節損傷模型 | |
| COIP | 腦癱模型 | |
| 免疫組化/熒光 | 癲癇模型 | |
| 抑郁癥模型 | ||
| 行為學檢測 | 腎臟缺血再灌注模型 | |
| 水迷宮檢測 | 關節炎 | |
| 十字架 | 肺氣腫模型 |
六、實驗服務流程
無錫菩禾生物是一家專業提供生物醫藥技術服務和細胞整體解決方案的高科技企業。擁有CMA 質量體系認證的實驗室，5大技術平臺（細胞平臺、分子平臺、免疫平臺、病理平臺、動物平臺），以專業、嚴謹、求真、高效服務理念，為全國科研工作者提供一站式技術檢測服務。
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