蛋白質和多肽類藥物的研究和發展已經成為生物醫藥領域研究的一個熱點。二硫鍵在維持多肽和蛋白質的空間立體結構及由此決定的生物活性中發揮著重要的作用。我們在多肽領域內長期深入的研究，讓我們積累了大量的寶貴經驗，我們已經成功給客戶交付了大量的包括一對和兩對以上二硫鍵成環的多肽，并保持了我們高成功率，高質量的特色。
1. 二硫鍵反應條件選擇
      二硫鍵即為蛋白質或多肽分子中兩個不同位點Cys的巰基（-SH）被氧化形成的S-S共價鍵。一條肽鏈上不同位置的氨基酸之間形成的二硫鍵，可以將肽鏈折疊成特定的空間結構。多肽分子通常分子量較大，空間結構復雜，結構中形成二硫鍵時要求兩個半胱氨酸在空間距離上接近。此外，多肽結構中還原態的巰基化學性質活潑，容易發生其他的副反應，而且肽鏈上其他側鏈也可能會發生一系列修飾，因此，肽鏈進行修飾所選取的氧化劑和氧化條件是反應的關鍵因素，反應機理也比較復雜，既可能是自由基反應，也可能是離子反應。
      反應條件有多種選擇，比如空氣氧化，DMSO氧化等溫和的氧化過程，也可以采用H2O2，I2，汞鹽等激烈的反應條件。
空氣氧化法：
空氣氧化法形成二硫鍵是多肽合成中最經典的方法，通常是將巰基處于還原態的多肽溶于水中，在近中性或弱堿性條件下（PH值6.5-10），反應24小時以上。為了降低分子之間二硫鍵形成的可能，該方法通常需要在低濃度條件下進行。
碘氧化法：
將多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中，逐滴滴加10-15mol/L的碘進行氧化，反應15-40min。當肽鏈中含有對碘比較敏感的Tyr、Trp、Met和His的殘基時，氧化條件要控制的更精確，氧化完后，立即加入維生素C或硫代硫酸鈉除去過量的碘。
2. 二對及多對二硫鍵成環策略
當序列中有兩對或多對二硫鍵需要成環時，通常有兩種情況：
自然隨機成環:
序列中的Cys之間隨機成環，與一對二硫鍵成環條件相似；
定點成環：
定點成環即序列中的Cys按照設計要求形成二硫鍵，反應過程相對復雜。在固相合成多肽之前，需要提前設計幾對二硫鍵形成的順序和方法路線，選擇不同的側鏈巰基保護基，利用其性質差異，分步氧化形成兩對或多對二硫鍵。通常采用的巰基保護基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多種基團。
對于二對及多對二硫鍵成環的多肽，我們在設計好二硫鍵形成順序及Cys側鏈保護策略后，對于每一對二硫鍵成環后，我們都會取少量樹脂切割，并對切割后產品進行MS驗證，MS驗證圖譜在發貨的時候會一并提供給客戶。

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