展青霉素是一種世界范圍內(nèi)的水果污染物，在多種水果、水果制品和果酒中均有發(fā)現(xiàn)，對人及動物具有較強的毒性作用。當人攝取了展青霉素，可通過影響細胞膜的透過性間接地引起生理呼吸異常。鑒于展青霉素的毒性及其污染情況，開展展青霉素的檢測非常必要。

逗點生物采用最新自主研發(fā)的Copure®228多功能凈化柱，建立蘋果醋中展青霉素的LC-MS/MS檢測方法。該方法低、中、高三個水平的加標回收率均在90-100 %之間，RSD小于2 %，操作簡便快捷，與國內(nèi)外的競品相比，具有回收率高和凈化效果好的優(yōu)勢，能夠作為蘋果醋中展青霉素的參考方法。


 

本方法適用于蘋果、山楂、果蔬汁類和酒類食品中展青霉素的測定。

參照 《GB 5009.185-2016 食品安全國家標準食品中展青霉素的測定》。
 

一、樣品前處理

1.1  樣品提取

（1）稱取4 g樣品，加入一定量同位素內(nèi)標工作液，混合均勻，用乙腈定容至25 mL。

（2）渦旋5 min，6000 r/min離心5 min，取上清液，待凈化用。

1.2  樣品凈化

（1）向玻璃試管中加入10 mL樣品提取液。

（2）將凈化柱橡膠頭從試管頂端插入試管中，并向下壓凈化柱至試管底端。

（3）將凈化柱上部凈化后的樣品提取液取出至樣品瓶或EP管中。

（4）取5 mL凈化提取液，加入20 μL乙酸，氮氣吹干，用1 mL乙酸溶液復溶，渦旋30 s 溶解殘渣，過微孔濾膜，上機分析。




二、儀器條件

儀器設備：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀 SCIEX Triple Quad™ 4500

色譜柱：ACQUITY UPLC T3 2.1*50mm 1.8μm

流動相：A：一級水    B：乙腈

流動相梯度：初始95%A，95%A（0min~3min），0%A（3.2min~4min），95%A（4.2min ~6.0min）

流速：0.3 mL/min

柱溫：室溫

進樣體積：10.0 mL

質(zhì)譜條件：

檢測方式：多離子反應檢測（MRM）；

表1 離子源控制條件
 

表2 離子選擇參數(shù)（注：*為定量離子）

三、實驗結(jié)果

表3  蘋果醋中展青霉素加標回收實驗結(jié)果

圖1 不同品牌多功能凈化柱處理加標樣品后的TIC色譜圖
 

圖2 使用Copure®228凈化后的加標樣品的EIC色譜圖

四、訂購信息