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全自動化DNA文庫構建技術簡介

瀏覽次數:5315 發布日期:2016-8-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

在二代測序中,基因文庫的構建是一項十分耗時耗力的工作,需要熟練的科研技術人員在整個操作過程中保持需高度注意力,花費大量時間和精力才能完成建庫工作。因此,大多數實驗室有將文庫構建工作自動化的需求,以節省人力。

應文庫構建自動化的需求,派瑪.迪格(PrimaDiag)公司研發了ACSIA NGSLibPrep自動建庫平臺,該平臺移液精準,重復性高,使用了創新專利技術APIM(感應磁化吸引技術)處理磁珠,根據需求通電或斷電產生磁力和去磁化,溫度控制精準到0.1℃,震蕩速度200 - 3000 rpm范圍可調。

歸功于ACSIA平臺的靈活性,派瑪.迪格公司的科研人員將NEBNext Ultra DNA kit的文庫構建操作步驟在ACSIA文庫構建平臺上實現了全自動化。派瑪.迪格公司將提供優化好的預設程序,中途不需要人工干預,一次實現96個文庫的全自動化構建。3小時的人手建庫工作,使用自動化平臺,只需人手操作10分鐘。

經過優化的操作步驟允許使用最少的槍頭數來完成整個建庫工作,大大節約試劑和耗材成本。例如構建48個DNA文庫僅需要3盒槍頭,而人工操作使用的槍頭數會達到14盒之多。

比較ACSIA全自動化和人工建立的文庫,DNA片段大小分別是338 bp 和 340 bp,結果十分相近,而使用ACSIA建庫得到文庫質量比人工建庫高將近30%。

減少人手操作時間,極大的節省槍頭成本,文庫得率顯著增加,使得NEBNextUltra DNA kit 在ACSIA NGSLibPrep自動文庫構建平臺上完美實現全自動化建庫。

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