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ELISpot實驗操作流程介紹

瀏覽次數:6591 發布日期:2014-4-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

 

ELISPOT全名為酶聯免疫斑點檢測,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(即ELISA技術),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。其技術原理,一句話概括就是:用抗體捕獲培養中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯斑點顯色的方式將其表現出來。

將細胞因子特異性單克隆抗體包被于乙醇處理過的PVDF膜板上具體板子處理和包被方法請參考
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/plate-coating-guide

 

將細胞加入到酶標孔中不同組加不同的刺激劑或者不加刺激劑 具體細胞處理方法請參考
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/cell-handling

 

細胞分泌的細胞因子與包被抗體結合

 

將多余細胞除去并洗板后將生物素標記的檢測抗體加入到酶標孔中

加入連霉親和素標記的酶偶聯物

加入底物
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/enzymes-substrates/enzyme-conjugates

使用酶聯免疫斑點讀板儀讀取斑點并分析信息來源
https://www.mabtech.com/knowledge-center/assay-principles/elispot-assay-principle/elispot-step-step

 閱讀原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014040021.html

發布者:杭州聯科生物技術股份有限公司
聯系電話:4006721600
E-mail:network@liankebio.com

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