犬副流感病毒（Canine Parainfluenza Virus, CPIV）屬于副黏病毒科副黏病毒亞科，是引起犬呼吸道疾病的重要病原之一。其病毒粒子中的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白在病毒復(fù)制、致病及免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用，以下從蛋白類型、結(jié)構(gòu)、分子量等參數(shù)展開(kāi)介紹：

 

一、病毒結(jié)構(gòu)與蛋白組成

CPIV 為單股負(fù)鏈 RNA 病毒，病毒粒子呈球形，直徑約 150-250 nm，由核心蛋白和包膜蛋白組成，主要蛋白包括：

 

二、主要結(jié)構(gòu)蛋白及參數(shù)

1. 核衣殼蛋白（Nucleocapsid Protein, N 蛋白）

蛋白結(jié)構(gòu)： 

由病毒基因組 RNA 與 N 蛋白結(jié)合形成核衣殼（螺旋對(duì)稱結(jié)構(gòu)），N 蛋白單體通過(guò) α- 螺旋和 β- 折疊形成緊湊的球狀結(jié)構(gòu)，包裹并保護(hù)病毒 RNA。

分子量：約 58-60 kDa。

功能： 

參與病毒 RNA 的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，與 RNA 依賴的 RNA 聚合酶（L 蛋白）相互作用，調(diào)控基因組表達(dá)。

2. 磷蛋白（Phosphoprotein, P 蛋白）

蛋白結(jié)構(gòu)： 

高度磷酸化的可溶性蛋白，結(jié)構(gòu)中含多個(gè)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域，可形成同源多聚體。

分子量：約 60-65 kDa（因磷酸化程度不同略有差異）。

功能： 

作為 L 蛋白的輔助因子，參與病毒 RNA 聚合酶復(fù)合體的組裝，調(diào)控轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過(guò)程。

3. 大聚合酶蛋白（Large Polymerase Protein, L 蛋白）

蛋白結(jié)構(gòu)： 

復(fù)雜的多功能酶蛋白，含多個(gè)結(jié)構(gòu)域（如甲基轉(zhuǎn)移酶、聚合酶活性中心），空間結(jié)構(gòu)呈 “球形 - 柄狀”。

分子量：約 200-250 kDa，是病毒中最大的結(jié)構(gòu)蛋白。

功能： 

具有 RNA 依賴的 RNA 聚合酶活性，催化病毒基因組的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制，同時(shí)參與 mRNA 的加帽和多聚腺苷酸化。

4. 包膜糖蛋白

CPIV 包膜上嵌有兩種糖蛋白，通過(guò)二硫鍵或非共價(jià)鍵形成突起，是病毒感染和免疫應(yīng)答的關(guān)鍵分子：

 

血凝素神經(jīng)氨酸酶蛋白（Hemagglutinin-Neuraminidase Protein, HN 蛋白）

 

結(jié)構(gòu)： 

Ⅱ 型跨膜糖蛋白，由同源二聚體或四聚體組成，胞外區(qū)含血凝素和神經(jīng)氨酸酶活性結(jié)構(gòu)域，形成柱狀突起。

分子量：約 60-70 kDa（糖基化后可達(dá) 90 kDa）。

功能： 

血凝素活性：識(shí)別并結(jié)合宿主細(xì)胞表面唾液酸受體，介導(dǎo)病毒吸附；

神經(jīng)氨酸酶活性：水解唾液酸，促進(jìn)病毒粒子從宿主細(xì)胞釋放，避免自聚集。

融合蛋白（Fusion Protein, F 蛋白）

 

結(jié)構(gòu)： 

Ⅰ 型跨膜糖蛋白，由 F1 和 F2 亞基通過(guò)二硫鍵連接，未激活時(shí)以三聚體形式存在，激活后構(gòu)象改變暴露融合肽。

分子量：約 55-60 kDa（未糖基化），糖基化后可達(dá) 70-80 kDa。

功能： 

介導(dǎo)病毒包膜與宿主細(xì)胞膜的融合，促進(jìn)病毒基因組進(jìn)入細(xì)胞；

F 蛋白構(gòu)象變化是病毒感染的關(guān)鍵步驟，其抗原表位可誘導(dǎo)中和抗體產(chǎn)生。

三、非結(jié)構(gòu)蛋白

CPIV 基因組還可編碼非結(jié)構(gòu)蛋白（如 V 蛋白、C 蛋白），由 P 基因通過(guò) RNA 編輯或不同閱讀框翻譯產(chǎn)生：

 

V 蛋白 

分子量：約 30-35 kDa，含鋅指結(jié)構(gòu)域。

功能：抑制宿主干擾素通路，拮抗天然免疫應(yīng)答，促進(jìn)病毒復(fù)制。

C 蛋白 

分子量：約 20-25 kDa，結(jié)構(gòu)富含脯氨酸和酸性氨基酸。

功能：調(diào)控病毒轉(zhuǎn)錄和復(fù)制，參與病毒粒子組裝，干擾宿主細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)。

四、蛋白結(jié)構(gòu)特征對(duì)比表

蛋白類型分子量范圍結(jié)構(gòu)特點(diǎn)關(guān)鍵功能

N 蛋白 58-60 kDa 球形結(jié)構(gòu)，包裹 RNA 保護(hù) RNA，調(diào)控復(fù)制轉(zhuǎn)錄

P 蛋白 60-65 kDa 磷酸化，卷曲螺旋結(jié)構(gòu) 輔助 L 蛋白，形成聚合酶復(fù)合體

L 蛋白 200-250 kDa 多結(jié)構(gòu)域酶蛋白 RNA 聚合酶活性，催化基因表達(dá)

HN 蛋白 60-90 kDa（糖基化后） Ⅱ 型跨膜，血凝素 / 神經(jīng)氨酸酶結(jié)構(gòu)域 吸附宿主細(xì)胞，促進(jìn)病毒釋放

F 蛋白 55-80 kDa（糖基化后） Ⅰ 型跨膜，F(xiàn)1-F2 亞基，融合肽 膜融合，誘導(dǎo)中和抗體

V/C 蛋白 20-35 kDa 含鋅指結(jié)構(gòu)（V 蛋白）、脯氨酸富集（C 蛋白） 拮抗宿主免疫，調(diào)控病毒生命周期

五、生物學(xué)意義與應(yīng)用

致病機(jī)制： 

HN 蛋白和 F 蛋白協(xié)同作用，使病毒吸附并侵入呼吸道上皮細(xì)胞；V/C 蛋白抑制宿主免疫，導(dǎo)致持續(xù)感染和呼吸道炎癥。

診斷標(biāo)志物： 

N 蛋白和 F 蛋白免疫原性強(qiáng)，常用于 ELISA、免疫熒光（IFA）檢測(cè)病毒抗原或抗體，或通過(guò) RT-PCR 檢測(cè) N 基因診斷感染。

疫苗研發(fā)： 

滅活疫苗或亞單位疫苗以 F 蛋白和 HN 蛋白為主要抗原，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，是犬副流感疫苗的核心組分。

六、研究進(jìn)展

新型疫苗：重組 F 蛋白或 HN 蛋白亞單位疫苗已進(jìn)入臨床前研究，相比傳統(tǒng)滅活疫苗具有更高的安全性和免疫原性。

抗病毒藥物：針對(duì) L 蛋白聚合酶活性的小分子抑制劑正在開(kāi)發(fā)，以阻斷病毒 RNA 復(fù)制。

總結(jié)

犬副流感病毒蛋白通過(guò)精確的結(jié)構(gòu)與功能分工，介導(dǎo)病毒的吸附、入侵、復(fù)制及免疫逃逸。其中包膜糖蛋白（F 和 HN）是疫苗和診斷的核心靶點(diǎn)，而核衣殼蛋白和聚合酶蛋白則為病毒基因組的表達(dá)提供保障。深入研究這些蛋白的結(jié)構(gòu)與功能，對(duì)犬副流感的防控具有重要意義。