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使用生物方法消除凝膠法細菌內毒素檢查的干擾因素

瀏覽次數:1169 發布日期:2022-7-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

由于鱟試劑凝集系統中存在著G因子反應旁路可以被β-葡聚糖激活產生細菌內毒素檢查的“假陽性”,通常采用生物方法消除于擾。

USP、EP及JP在最新修訂的統一的細菌內毒素檢查法中就對鱟試劑的使用作了注釋:除內毒素外,鱟試劑也與某些β-葡聚糖反應。一些經過處理而制備的鱟試劑不與β-葡聚糖反應,含有β-葡聚糖的樣品必須使用特異性鱟試劑檢查。
 


 

不同的特異性鱟試劑有不同的特點。無G因子鱟試劑是將普通鱟試劑中存在的G因子,以親和層析方法分離去除,即使被測樣品中存在真菌多糖(非內毒素),也不能產生活化的G因子,旁路反應被阻斷,使成為對內毒素具有特異性。另一種特異性鱟試劑是采用一種特殊試劑,只除去抗LPS因子,而保留抗G因子,以達到即增加了對內毒素的敏感性,又削弱了真菌多糖活性G因子的能力。

此外,1990年Tsuchiya M報道[1],由于真菌多糖與普通鱟試劑反應形成凝膠,有一個特定濃度范圍(10-3~ 10-6 mg/ml),大于或小于這個濃度都不能成膠,故在制備普通鱟試劑的基礎上,加入過量的真菌多糖1mg/ml),可阻止G因子的活化,即“封閉”了旁路,達到制備特異鱟試劑的目的。復方丹參注射液、清開靈注射液﹑參麥注射液則是通過加入(1-3)-β-D葡聚糖來消除干擾的[2]。


為了避免β-葡聚糖的干擾,葉良君建議在日常工作中,應盡量用特異性鱟試劑代替普通鱟試劑進行含糖大輸液及其他大輸液細菌內毒素的檢查,如果使用的是普通鱟試劑,應該在排除干擾的情況下結論;同時,應該完善藥典中葡萄糖原料的質量標準,β-葡聚糖的含量控制應納入檢測范圍,在生產中最好使用定點廠家的合格葡萄糖原料。

應當注意,由于不同廠家生產的鱟試劑其特異性也不同,有時甚至相差很遠,因此一旦出現內毒素陽性時,應在排除葡聚糖干擾后再慎下結論以免誤判。

參考文獻:
[1] Tsuehiya M.Development of all endotoxin·speetle limuhs ameboeyte lysate test bloekingβ-glUCan-mediated pathway by earboxymethylated curdlsn and its appli- cation[J].Jpn J Baaed,1990,45(6):903-906

[2] 陳吉生,楊澤民.5種中草藥注射劑細菌內毒紊檢查方法的研究[J].中國 藥房,2001,12(5):311-314

發布者:科德角國際生物醫學科技(北京)有限公司
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