on-chip無菌無損傷免維護的流式細胞分選儀原理及新應用
傳統(tǒng)流式的高壓電荷式分選會對細胞產(chǎn)生一定的損害，對研究細胞原本的性能及特性造成很大的不便。日本On-chip生物技術(shù)有限公司針對這一弊端，于2012年推出了一款對細胞無損傷，確保臨床應用的無污染，免維護的流式細胞儀（On-Chip）。 這款小型的儀器使用微流控芯片模塊，利用空氣壓力控制，對模塊內(nèi)的樣品流進行細胞分離，最多配置3激光6熒光。以低壓對細胞進行分選，從而實現(xiàn)無損傷分離。使用一次性交換型模塊，各個樣品間保證無污染，也無需清洗流路通道，簡單方便。
創(chuàng)新之處
1、使用一次性交換型模塊
On-chip 使用的交換式微流體模塊是含有鞘液槽及廢液槽的整體設計，以丙烯酸樹脂為材質(zhì)制造。由于On-chip具有分析型和分選型兩種機型，因此也可根據(jù)實驗需要選擇適合的模塊以及是否進行過無菌處理的交換模塊。
1、使用一次性交換型模塊
On-chip 使用的交換式微流體模塊是含有鞘液槽及廢液槽的整體設計，以丙烯酸樹脂為材質(zhì)制造。由于On-chip具有分析型和分選型兩種機型，因此也可根據(jù)實驗需要選擇適合的模塊以及是否進行過無菌處理的交換模塊。
2、分選原理
分選的結(jié)構(gòu)部分不在微型模塊內(nèi)，使用裝置內(nèi)裝的空氣泵及高速電磁脈沖形成空氣壓來控制模塊內(nèi)樣品的流動，實現(xiàn)低成本化。
分選的結(jié)構(gòu)部分不在微型模塊內(nèi)，使用裝置內(nèi)裝的空氣泵及高速電磁脈沖形成空氣壓來控制模塊內(nèi)樣品的流動，實現(xiàn)低成本化。
如下圖所示，樣品液給予正常的空氣壓，以大約500mm/秒的速度流動，和鞘液結(jié)合后經(jīng)過激光照射區(qū)域，判斷是否為目的細胞。在其通過下側(cè)的十字形分選回路的瞬間給予脈沖的空氣壓，使目的細胞高速進入Pull側(cè)的回收回路。樣品推送的液體壓力以大氣壓為基準大約2kPa，是傳統(tǒng)流式細胞儀壓力的1/100；分選時的壓力比通常流式細胞儀推送液體的壓力低，大約50kPa以下。因此，On-chip Sort不會形成傳統(tǒng)流式分選時高壓，滴液，負電荷等現(xiàn)象，從而實現(xiàn)細胞無損傷分選。
3、適用于細胞分析的創(chuàng)新光路
On-chip Sort最多可升級為3個激光6色8參數(shù)。可選擇的激光器包括405nm,488nm,561nm,637nm，785nm五種。標準配置為488nm,561nm,637nm的組合。在交換模塊時候配置了防止位置偏移和傾斜的CCD照相機，可以確認流路的位置。檢驗側(cè)散光的時候，45度傾斜使得側(cè)散光向下實現(xiàn)全反射，開發(fā)出
來獨特的光學回路（SLER光學回路）。使用CCD照相機進行流路和激光位置確認，自動完成光路的調(diào)整，方便使用。
On-chip Sort最多可升級為3個激光6色8參數(shù)。可選擇的激光器包括405nm,488nm,561nm,637nm，785nm五種。標準配置為488nm,561nm,637nm的組合。在交換模塊時候配置了防止位置偏移和傾斜的CCD照相機，可以確認流路的位置。檢驗側(cè)散光的時候，45度傾斜使得側(cè)散光向下實現(xiàn)全反射，開發(fā)出
來獨特的光學回路（SLER光學回路）。使用CCD照相機進行流路和激光位置確認，自動完成光路的調(diào)整，方便使用。
4、無損傷分選應用實例
利用On-chip Sort對小鼠的胎兒腦部海馬神經(jīng)細胞進行分選。傳統(tǒng)分選方法分選的細胞（左）培養(yǎng)7天后基本都已經(jīng)死亡，使用我司設備分離的細胞（右）則無損傷，可以看到神經(jīng)觸角有伸縮的能力。
利用On-chip Sort對小鼠的胎兒腦部海馬神經(jīng)細胞進行分選。傳統(tǒng)分選方法分選的細胞（左）培養(yǎng)7天后基本都已經(jīng)死亡，使用我司設備分離的細胞（右）則無損傷，可以看到神經(jīng)觸角有伸縮的能力。
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