志賀氏菌檢測新國標厭氧條件增菌的解決方案

新頒國標

2012年5月17日，中華人民共和國衛生部頒GB 4789.5-2012《食品安全國家

標準食品微生物學檢驗 志賀氏菌檢驗方法》，于2012年7月17日起實施。
該標準實施之日起，原GB/T4789.5-2003標準作廢。 

解讀GB4789.5-2012
為了提高食品中志賀氏菌檢出率，降低操作者的操作要求，增菌過程的調整是本次新標準最大的變動之處。 
兩份國標方法之間增菌部分的主要區別如下表所示： 

	GB4789.5-2003	GB4789.5-2012
增菌培養基	GN增菌肉湯	志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素
取樣操作	無菌均質器或研缽	無菌均質器或拍擊式均質器
增菌培養條件	37℃，有氧培養6~8小時	41.5℃，厭氧培養16~20小時
……	……	……

更改增菌培養方式的最終目的是最大程度消除食物樣品中的雜菌背景對于檢測培養的影響。 
1、厭氧環境41.5℃培養，可排除需氧菌和大部分不耐熱的厭氧菌與兼性厭氧菌干擾；
2、使用志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素進行增菌，可排除革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性腸桿菌（如變形桿菌等）的干擾； 
減少雜菌背景的同時，也降低了雜菌在增菌過程中對于數量很少的志賀氏菌的競爭抑制作用，可有效地提高志賀氏菌的擴增量，有助于進一步的分離與鑒定。

厭氧增菌的解決方案
不同于常規厭氧培養，本標準中的增菌培養是在無菌三角燒瓶或無菌勻質袋中進行，故厭氧袋因容積限制而無法使用，因此推薦以下專業解決方案：

解決方案一：每日樣品檢測量30~50份的實驗室，建議配備AG300型厭氧工作站。
型號           AG300
最大培養容量： 50只（250ml標準三角燒瓶）
              30只（500ml標準三角燒瓶）
傳輸艙容量：   2只（250/500ml標準三角燒瓶）
（* 三角燒瓶底徑需小于100mm，高度小于200mm）
 
解決方案二：
每日樣品檢測量極少（≤30份）的實驗室，A30厭氧培養系統，此方案需要將厭氧罐放入生化培養箱中培養。
型號           A30厭氧培養系統配20L培養罐
最大培養容量：  20只（250ml標準三角燒瓶）