• GW6471 (HY-15372) 在本研究中用于小鼠口服，探索抑制 PPARα 改善高脂代謝的機(jī)制。
• Tyloxapol (HY-B1068) 在本研究中用于構(gòu)建高脂血癥小鼠，探索脂肪酸攝取。
• Sulfo-Cy7.5 NHS ester (HY-D1568) 在本研究中用于標(biāo)記細(xì)胞外囊泡，探索細(xì)胞外囊泡的活體示蹤。
• BODIPY 581/591 C11 (HY-D1301) 在本研究中用于處理細(xì)胞，探索脂質(zhì)過氧化水平。

 

• 腸道特異性缺乏 HLF 可改善 MAFLD。
• HLF 通過 PPARα 在脂肪代謝調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用。
• HLF/PPARα 軸調(diào)節(jié)腸道微生物群并影響腸道微生物衍生的 fEV 的組成。
• TCDCA是 fEVs 改善 MAFLD 的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因素。

• Tyloxapol (HY-B1068) 在本研究中用于構(gòu)建高脂血癥小鼠，探索脂肪酸攝取。

實(shí)驗(yàn)步驟
小鼠禁食 16 小時(shí)后，腹腔注射 Tyloxapol (500 mg/kg；HY-B1068)。

引用產(chǎn)品 2：活性小分子類

• GW6471 (HY-15372) 在本研究中用于小鼠口服，探索抑制 PPARα 改善高脂代謝的機(jī)制。 

實(shí)驗(yàn)步驟
1. 購買 6 周齡雄性 C57BL/6 小鼠，在 8 周齡時(shí)，將小鼠隨機(jī)分為兩組 (每組 6-8 只)：(1) 高脂飲食組 (HFD 組)，喂食高脂飲食 (HFD, 5.5 kcal/g) 并灌胃生理鹽水；(2) HFD + GW6471 組，喂食高脂飲食并灌胃 GW6471 (10 mg/kg；HY-15372)。
2. 在高脂飲食喂養(yǎng) 4 周后，從 12 周齡開始，每隔一天通過口服 GW6471，持續(xù) 8 周。
3. 在整個實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠可自由攝食和飲水，并維持在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室條件下 (溫度：25 ± 2°C，濕度：50 ± 5%，12 小時(shí)光照/黑暗循環(huán))。

• Sulfo-Cy7.5 NHS ester (HY-D1568)：在本研究中用于標(biāo)記細(xì)胞外囊泡，探索細(xì)胞外囊泡的活體示蹤。

體內(nèi)追蹤顯示 fEVs 在大約 6 小時(shí)內(nèi)到達(dá)肝臟，24 小時(shí)后信號減弱 (圖 5A)。組織成像顯示 fEVs 在肝臟和腸道中積聚 (圖 3)。
 

• BODIPY 581/591 C11 (HY-D1301)：在本研究中用于處理細(xì)胞，探索脂質(zhì)過氧化水平。

實(shí)驗(yàn)步驟
1. 脂質(zhì)過氧化熒光染色使用 BODIPY 581/591 C11 熒光探針 (HY-D1301) 進(jìn)行。
2. 將 1 mg BODIPY 581/591 C11 溶解在 0.1983 mL DMSO 中以獲得 10 mM BODIPY 581/591 C11。
3. 在無血清細(xì)胞培養(yǎng)中稀釋儲備液培養(yǎng)基取 10 μM BODIPY 581/591 C11 工作液。4. 首先細(xì)胞在 24 孔板中培養(yǎng) 24 h，之后，加藥處理細(xì)胞 24 h。
5. 隨后，用 PBS 清洗細(xì)胞，加入 1 mL BODIPY 581/591 C11 工作液，室溫孵育 30 分鐘。
6. 避光清洗細(xì)胞 3 次，通過酶標(biāo)儀檢測紅色熒光 (還原型；Ex=581 nm, Em=591 nm)，與脂質(zhì)結(jié)合后會產(chǎn)生綠色熒光 (氧化型；Ex=500 nm, Em=510 nm)。數(shù)據(jù)以紅光強(qiáng)度/綠光強(qiáng)度比值表示。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果
如下圖，實(shí)驗(yàn)表明，TCDCA (fEVs 改善 MAFLD 的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子) 可降低氧化應(yīng)激 (氧化應(yīng)激可增加脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物和細(xì)胞因子的釋放, 介導(dǎo) NAFLD 的發(fā)生發(fā)展)。

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Section.04
小結(jié)

再次恭喜我們的客戶成功發(fā)刊！該研究首次提出腸道特異性缺乏 HLF 改善 MAFLD，HLF/PPARα 軸通過腸道微生物來源的 fEVs 調(diào)節(jié)腸肝循環(huán)和抑制肝細(xì)胞鐵死亡，從而改善 MAFLD。結(jié)果顯示，結(jié)合型膽汁酸 TCDCA 為 fEVs 降脂作用的關(guān)鍵分子。這些發(fā)現(xiàn)闡明了腸道 HLF 在調(diào)節(jié) MAFLD 中的功能，并為治療該疾病提供了新的途徑。
 

產(chǎn)品推薦

Tyloxapol (HY-B1068)  Tyloxapol 是一種烷基芳基聚醚醇型非離子液體聚合物，用作表面活性穩(wěn)定劑。Tyloxapol 用于誘導(dǎo)動物高脂血癥。

GW6471 (HY-15372) GW6471 是一種有效的 PPARα 拮抗劑。

Sulfo-Cy7.5 NHS ester (HY-D1568) Sulfo-Cy7.5 NHS ester 是一種近紅外水溶性親水性染料，也是一種用于胺基改性的 NHS 酯。Sulfo-Cy7.5 NHS ester 包含一個三甲基炔橋，并有一個連接臂，用于其連接到蛋白質(zhì)，多肽和其他分子。Sulfo-Cy7.5 NHS ester 可用于近紅外成像應(yīng)用的研究。

BODIPY 581/591 C11 (HY-D1301) BODIPY 581/591 C11 是一種 BODIPY 氟硼熒衍生物，具有良好的光穩(wěn)定性、低熒光偽影特質(zhì)。BODIPY 581/591 C11 常用于活細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化和抗氧化性能的研究，或與羥基自由基反應(yīng)、檢測鐵死亡。BODIPY 581/591 C11 本身為紅色熒光 (還原型；Ex=581 nm, Em=591 nm)，與脂質(zhì)結(jié)合后會產(chǎn)生綠色熒光 (氧化型；Ex=500 nm, Em=510 nm)。

[1] Yang X, Wang J, Qi X, Hou M, Liu M, Xiao Y, Liu S, Zhou J, Yu J, Wang Y, Chen G, Yu L, Batchuluun K, Batsaikhan B, Damba T, Liang Y, Liang X, Ma J, Liang Y, Li Y, Zhou L. HLF and PPARα axis regulates metabolic-associated fatty liver disease through extracellular vesicles derived from the intestinal microbiota. Imeta. 2025 Apr 7;4(2):e70022.