多重qPCR核心特點、優勢及應用領域的介紹

瀏覽次數：305　發布日期：2025-6-18　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

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告別“單打獨斗”，多重qPCR支持“團隊作戰”
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什么是多重qPCR
多重qPCR是實時熒光定量PCR技術的一種高級形式。它是在同一個PCR反應體系中，同時使用多對引物和多個特異性的探針（或染料），針對兩個或兩個以上的不同目標核酸序列（靶基因）進行擴增和實時定量檢測。簡單來說，就是“一管反應，多個目標”。

多重qPCR核心特點與優勢

并行檢測：同時檢測多個靶標。
節省樣本：對珍貴或有限的樣本（如臨床活檢、稀有細胞）特別有價值。
節省試劑與時間：比進行多個單重qPCR反應顯著減少試劑消耗和操作時間。
節省成本：降低了每個靶標檢測的成本。
減少誤差：所有靶標在完全相同的反應條件下進行擴增，減少了管間差異帶來的誤差，結果可比性更高。
提高通量：非常適合高通量篩查和需要同時檢測多個指標的應用（如病原體分型、多基因表達分析、SNP分型等）。
內參共檢：可以輕松地將內參基因與目標基因放在同一個反應中進行檢測，提高定量的準確性。

多重qPCR主要應用領域

病原體檢測與分型（如同時檢測多種病毒、細菌或耐藥基因）
基因表達分析（同時檢測多個功能相關基因或通路基因）
基因分型（如SNP、插入/缺失檢測）
轉基因檢測（同時檢測多個轉基因元件或品系特異性標記）
拷貝數變異分析
食品安全檢測（同時檢測多種過敏原或污染物）

多重qPCR主要類型
多重qPCR主要根據所使用的化學發光方法來分類，主要包括：

水解探針法：最常用，高特異高靈敏，多重能力取決于通道數。
染料法：成本最低，但特異性低，多重能力有限（依賴Tm差異）。
分子信標法：背景低，對點突變鑒別強，設計復雜。
Scorpions法：速度快靈敏度高，設計最復雜成本最高。

在實際應用中，基于水解探針的多重qPCR因其良好的平衡性（特異性、靈敏度、多重能力、相對成熟度）而成為絕對的主流。染料法主要用于靶標少且Tm差異明顯、對成本敏感的非關鍵應用。分子信標和Scorpions則在特定需求場景下使用。

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