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C57小鼠皮膚成纖維細胞原代培養(yǎng)的方法

瀏覽次數(shù):2067 發(fā)布日期:2022-7-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
                                                                     實驗方法

      1. 將實驗小鼠脫頸處死,75%乙醇浸泡5min,固定,備皮,取背部皮膚至于含雙抗的冷PBS緩沖液中。

      2. 仔細剝離脂肪,血管等多余組織,PBS清洗,加胰酶消化1h。

      3. 分離真表皮,去除表皮后,PBS清洗3次。

      4. 將真皮部分于培養(yǎng)皿內剪碎,加入適量胰酶,轉移至15ml離心管內,37℃恒溫水浴消化1h。

      5. 消化結束后,加入H-DMEM完全培養(yǎng)基終止反應,1000rpm離心5min,棄上清。

      6. PBS清洗一遍,離心棄上清。

      7. 將清洗后的組織塊均勻鋪于6cm培養(yǎng)皿內,加入2ml完全培養(yǎng)基,37℃,5%CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24h。

     8. 第二天,補充培養(yǎng)基至5ml,繼續(xù)培養(yǎng),3-4天后有細胞游出。

     9. 7天后已有大量細胞游出,去除組織塊并換新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

 
  • 實驗圖例
取材&分離
細胞培養(yǎng)
 

圖片
END
 
 

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學領域提供相關試劑產品和服務的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產業(yè)園。公司提供種類齊全的細胞系、質量穩(wěn)定的細胞培養(yǎng)試劑產品、成熟高效的技術服務、專業(yè)周到的技術支持。本著“守正創(chuàng)新,科學嚴謹”的理念,我們以高標準塑造行業(yè)品牌,以全新視野構建現(xiàn)代企業(yè),勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務范圍涉及全國各省市自治區(qū),與國內多家醫(yī)院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關系,贏得了良好的市場聲譽和廣泛的認可,我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè)、高效、優(yōu)質的產品及服務!細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細胞培養(yǎng)添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等;ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測序分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實驗 | RIP 實驗 | ChIP實驗 | Co-IP實驗 | 質譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等。

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