目前，機械灌注對于移植腎保護作用的機制尚不明確，而機械灌注所提供的流體剪切力（Flow Shear Stress, FSS）對供腎血管內皮細胞的具體作用有必要深入研究。此外，已有多項研究證明使用體外 FSS 系統可模仿體內血流通過血管內皮的生理狀態，并能夠直接影響內皮細胞酶的活性、蛋白功能及轉錄因子表達情況。

實驗結果
 

（1）Western blot結果發現，FSS可上調人臍靜脈內皮細胞（humanumbilical vein endothelial cell，HUVEC）細胞內p-腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase，AMPK）的相對表達，并隨時間延長而升高（p<0.05）；HUVEC細胞加載12dyn/cm2力適應2h后，去力培養，細胞內p-AMPK的相對表達隨時間延長逐漸降低（p<0.05）；二甲雙胍可明顯激活AMPK活性，并隨濃度的增加而升高（p<0.05）。

（2）免疫組化染色結果發現，HMP組腎臟組織內p-AMPK含量明顯高于CS組（p<0.05），且HMP與Normal組相比無統計學差異（p>0.05）；Met-CS組p-AMPK的相對表達水平也顯著高于CS組（p<0.05）；低溫持續灌注后腎臟組織內p-AMPK的表達主要分布于腎小管處，少數于腎小球內皮細胞和血管處。

（3）RT-PCR結果顯示加載12dyn/cm2力1h后，HUVEC細胞內KLF-2 mRNA的相對表達顯著高于CTL組（p<0.05），且1hFSS組細胞內Bcl-2/Bax比值低于CTL組（p<0.05），而兩組內p53 mRNA的相對表達無明顯差異（p>0.05）。體內實驗結果顯示HMP組和Met-CS組凋亡率明顯低于CS組（p<0.05）；同樣，HE染色發現CS組腎臟組織損傷嚴重，腎小管明顯水腫；Met-CS組腎小管水腫減輕，而HMP組大鼠腎臟損傷不明顯，無水腫，腎小管輕度擴張。

實驗結論
 

綜上所述，流體剪切力的改變可能通過AMPK途徑影響腎臟損傷，而持續灌注保存提供的流體剪切力可以通過激活AMPK/KLF-2信號通路，抑制組織細胞凋亡，減輕腎臟缺血再灌注損傷進而起到器官保護作用。二甲雙胍可以有效激活AMPK活性，也能夠減少供腎靜態低溫保存過程中冷缺血所導致的腎臟損傷。AMPK可能成為治療FSS缺失后IR損傷的潛在藥物靶點。

參考文獻：王誠. 流體剪切力在供腎持續灌注保存中的作用機制研究[D].蘭州大學,2018.

文章來源：http://www.naturethink.com/?news/143.html

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