大小鼠MCAO造模方法及如何提高成功率的方法介紹
大鼠MCAO造模方法
(1) 麻醉成功后以仰臥位固定于手術(shù)臺,常規(guī)備皮、消毒。將小鼠門齒利用縫合線鉤住、固定，使得頸部被拉伸，方便接下來的手術(shù)操作。利用常規(guī)眼科剪或手術(shù)刀從頸部正中切開,從頸正中切口,利用鑷子鈍性分離頸部腺體組織、筋膜,暴露并分離頸總動脈( common carotid artery, CCA)、頸外動脈( external carotid artery, ECA)和頸內(nèi)動脈( internal carotid artery, ICA)。
瑞沃德呼吸&麻醉解決方案
(2)分離ICA及其顱外分支翼顎動脈,利用縫合線打活結(jié)，結(jié)扎翼顎動脈，或者直接利用血管夾夾閉翼鄂動脈，避免線栓插入翼鄂動脈，保持CCA的唯一開放分支為ICA。
(3)分離ECA主干,并利用電凝筆閉塞ECA的分支,結(jié)扎遠(yuǎn)心端并將其間斷。在ECA殘端用眼科剪剪開一“V”型小口,剪口之前用微動脈夾夾閉CCA和ICA，避免剪口處出現(xiàn)出血。將預(yù)處理過帶硅膠頭的線栓小心地從ECA插入。
(4) 去除ICA的微動脈夾后,插入尼龍線栓直至大腦中動脈的起始處,線栓插入17-18mm(見下圖)。根據(jù)筆者的經(jīng)驗(yàn),線栓插入的長度應(yīng)根據(jù)動物體重,如260~280g大鼠,插入深度約17mm,280g以上的大鼠,插入深度約18mm,總之,以遇到輕微的阻力為準(zhǔn),此時(shí)線栓正好進(jìn)入顱內(nèi)的大腦前動脈,阻塞大腦中動脈的開口。
MCAO線栓法模型操作主要步驟示意圖
(5) 若要恢復(fù)大腦中動脈的血流,只需把線栓拔出,使頭端退到頸外動脈,頸總動脈的血流就可以再灌注到大腦中動脈。
(6) 結(jié)扎消毒后逐層縫合皮下組織和皮膚,等動物麻醉蘇醒后放回籠中即可。
(7) 手術(shù)結(jié)束后應(yīng)用激光散斑血流成像儀監(jiān)測大腦皮層血流,當(dāng)看到大腦皮層血液血流降低70%~80%,說明模型制備成功。
小鼠MCAO造模方法
小鼠MCAO模型的制作與大鼠的基本相同,可不結(jié)扎翼顎動脈,而是在進(jìn)線栓時(shí)調(diào)整角度小心避開。其他不同之處在于,線栓為5-0到8-0(除5-0外,通常都需要包裹硅膠),長度為15mm。根據(jù)動物體重的具體情況,線栓插入頸內(nèi)動脈(10±0.5)mm即可,保證線栓正好進(jìn)入顱內(nèi)的大腦前動脈,阻塞大腦中動脈的開口。
如何提高M(jìn)CAO造模成功率？
（1）挑選合適線栓，滿足一下幾點(diǎn)要求：
（2）采用散斑血流儀，實(shí)時(shí)觀測顱腦血流情況。這樣可以準(zhǔn)確判斷線栓是否阻塞MCA，一旦血流灌注量下降超過70%，即代表線栓阻塞MCA。
（3）MCAO線栓手術(shù)屬于顯微操作手術(shù)，不可控因素較多，需要多練習(xí)。一般常規(guī)連續(xù)練習(xí)3個(gè)月左右，即可實(shí)現(xiàn)造模；如果采用血流儀輔助造模，時(shí)間可以縮短至1個(gè)月，手術(shù)過程中可以實(shí)時(shí)調(diào)整線栓位置。另外現(xiàn)在發(fā)文越來越需要漂亮數(shù)據(jù)，瑞沃德的激光散斑血流儀RFLSI Ⅲ可提供高清漂亮血管血流分布圖。
(1) 麻醉成功后以仰臥位固定于手術(shù)臺,常規(guī)備皮、消毒。將小鼠門齒利用縫合線鉤住、固定，使得頸部被拉伸，方便接下來的手術(shù)操作。利用常規(guī)眼科剪或手術(shù)刀從頸部正中切開,從頸正中切口,利用鑷子鈍性分離頸部腺體組織、筋膜,暴露并分離頸總動脈( common carotid artery, CCA)、頸外動脈( external carotid artery, ECA)和頸內(nèi)動脈( internal carotid artery, ICA)。
瑞沃德呼吸&麻醉解決方案
(2)分離ICA及其顱外分支翼顎動脈,利用縫合線打活結(jié)，結(jié)扎翼顎動脈，或者直接利用血管夾夾閉翼鄂動脈，避免線栓插入翼鄂動脈，保持CCA的唯一開放分支為ICA。
(3)分離ECA主干,并利用電凝筆閉塞ECA的分支,結(jié)扎遠(yuǎn)心端并將其間斷。在ECA殘端用眼科剪剪開一“V”型小口,剪口之前用微動脈夾夾閉CCA和ICA，避免剪口處出現(xiàn)出血。將預(yù)處理過帶硅膠頭的線栓小心地從ECA插入。
MCAO線栓法模型操作主要步驟示意圖(5) 若要恢復(fù)大腦中動脈的血流,只需把線栓拔出,使頭端退到頸外動脈,頸總動脈的血流就可以再灌注到大腦中動脈。
(6) 結(jié)扎消毒后逐層縫合皮下組織和皮膚,等動物麻醉蘇醒后放回籠中即可。
小鼠MCAO造模方法
小鼠MCAO模型的制作與大鼠的基本相同,可不結(jié)扎翼顎動脈,而是在進(jìn)線栓時(shí)調(diào)整角度小心避開。其他不同之處在于,線栓為5-0到8-0(除5-0外,通常都需要包裹硅膠),長度為15mm。根據(jù)動物體重的具體情況,線栓插入頸內(nèi)動脈(10±0.5)mm即可,保證線栓正好進(jìn)入顱內(nèi)的大腦前動脈,阻塞大腦中動脈的開口。
如何提高M(jìn)CAO造模成功率？
（1）挑選合適線栓，滿足一下幾點(diǎn)要求：
- 線栓不可過硬。過硬線栓容易找手感，但是容易出現(xiàn)刺破蛛網(wǎng)膜下腔血管，導(dǎo)致顱內(nèi)出血。同時(shí)過硬線栓還會改變血管自然形態(tài)，當(dāng)線栓插入血管以后，因?yàn)榫�栓過硬，血管肌張力無法使得線栓改變形態(tài)，只能被線栓改變形態(tài)，導(dǎo)致血管處于緊繃狀態(tài)，對于再灌注操作不利。
- 選擇硅膠頭盡可能接近圓柱形的線栓，這樣當(dāng)線栓進(jìn)入MCA外后，能夠完全堵塞MCA，而不會出現(xiàn)縫隙，使得線栓可以立即阻塞MCA。
（2）采用散斑血流儀，實(shí)時(shí)觀測顱腦血流情況。這樣可以準(zhǔn)確判斷線栓是否阻塞MCA，一旦血流灌注量下降超過70%，即代表線栓阻塞MCA。
（3）MCAO線栓手術(shù)屬于顯微操作手術(shù)，不可控因素較多，需要多練習(xí)。一般常規(guī)連續(xù)練習(xí)3個(gè)月左右，即可實(shí)現(xiàn)造模；如果采用血流儀輔助造模，時(shí)間可以縮短至1個(gè)月，手術(shù)過程中可以實(shí)時(shí)調(diào)整線栓位置。另外現(xiàn)在發(fā)文越來越需要漂亮數(shù)據(jù)，瑞沃德的激光散斑血流儀RFLSI Ⅲ可提供高清漂亮血管血流分布圖。
瑞沃德激光散斑血流成像系統(tǒng)RFLSI Ⅲ
- Science文獻(xiàn)解讀：海馬社交記憶雌雄有別，雌性線索記憶關(guān)聯(lián)獎賞
- 纖維肌痛患者菌群移植可誘發(fā)小鼠疼痛超敏的研究
- 氣溶膠發(fā)生器在環(huán)境等科研領(lǐng)域的重要應(yīng)用
- 元森凱德與最新大小鼠肺纖維化模型制備評價(jià)規(guī)范
- 揭示神經(jīng)源性“別吃我’’信號IL-34介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞突觸修剪的研究
- 突觸的"自我穩(wěn)壓"奧秘揭曉之Sema3a蛋白如何跨器官守護(hù)神經(jīng)元通訊
- 抑制神經(jīng)元活性形成的脂滴可作為大腦突觸功能重要能量儲備的研究
- 高架十字迷宮助力揭示慢性壓力導(dǎo)致快感缺乏的神經(jīng)機(jī)制
- 千奧星科精彩亮相2025神經(jīng)科學(xué)技術(shù)研討會
- 腦-體互作研究前沿技術(shù)培訓(xùn)會在長沙成功舉辦
- 安徽正華邀您參加2025年實(shí)驗(yàn)動物模型標(biāo)準(zhǔn)研討會
- 慧榮和成功參展中國毒理學(xué)會第十次全國青年科技大會
- 康森特邀您相約2025年腦-體互作研究前沿技術(shù)培訓(xùn)會
- 瑞沃德激光散斑血流成像系統(tǒng)獲中美雙認(rèn)證
- 湖南醫(yī)藥學(xué)院-康森特生物科技實(shí)訓(xùn)基地圓滿揭牌
- 慧榮和成功亮相2025 API China助力醫(yī)藥研發(fā)與生產(chǎn)
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com