廈門大學公共衛(wèi)生學院夏寧邵、張?zhí)煊�團隊，與廈門大學附屬第一醫(yī)院李志勇團隊、中國疾病預防控制中心黃保英團隊聯(lián)合研究，基于VSV-SARS-CoV-2-Sdel18假病毒和ACE2過表達BHK21細胞構(gòu)建了一套穩(wěn)定的中和評價體系。本月初，該研究論文發(fā)表在預印本平臺bioRxiv上。
 

本研究對攜帶SARS-CoV-2全長或截短S蛋白的G蛋白缺陷型水泡性口炎病毒(VSVdG)的假病毒包裝效率以及不同細胞系用于假型病毒包裝和感染的效率進行了評價。研究發(fā)現(xiàn)，VSV-SARS-CoV-2-Sdel18（C末端截短18個氨基酸的S蛋白）的病毒包裝和感染效率遠高于VSV-SARS-CoV-2-S。而在本研究所使用的細胞系中，穩(wěn)定表達人ACE2的BHK21-hACE2對感染最敏感，Vero-E6對感染也有中等程度的敏感性，BHK21細胞對假病毒幾乎不敏感。基于VSV-SARS-CoV-2-Sdel18假病毒和ACE2過表達BHK21細胞(BHK21-hACE2)，建立了抗體篩選和驗證的中和分析模型。通過對EGFP陽性的細胞進行計數(shù)指征假病毒的感染情況，從而保證了高通量檢測能力。研究表明，用VSV-SARS-CoV-2-Sdel18假病毒法測定19例恢復期患者血清中和效價，與SARS-CoV-2活病毒法測定結(jié)果有較好的相關(guān)性。同時評價了7種抗SARS-CoV-2-S受體結(jié)合區(qū)(RBD)中和小鼠單克隆抗體(mAbs)的中和活性。該模型的高效性可助力針對SARS-CoV-2的新藥和疫苗研發(fā)。

不同細胞系假病毒感染效率比較。比較攜帶SARS-CoV-2 S蛋白或VSV G蛋白的VSVdG病毒在Vero-E6、BHK21、293T和BHK21-hACE2細胞系中的感染效率。