無需染色的細(xì)胞活力檢測介紹
細(xì)胞活力是總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比，其中臺盼藍(lán)染色方法最常見。臺盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色，而活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，故可以鑒別死細(xì)胞與活細(xì)胞。
激光全息細(xì)胞成像及分析系統(tǒng)可以實(shí)時監(jiān)測細(xì)胞死亡過程，以及通過圖像進(jìn)行記錄。 全息技術(shù)無需熒光和染料標(biāo)記就可以得到細(xì)胞形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)。Khmaladze A. et al(2012) 和Pavillion N. et al(2012)使用DHM研究細(xì)胞死亡過程，觀察到死亡過程中細(xì)胞體積顯著減小。Kuhn et al(2013)使用DHM研究活/死細(xì)胞特點(diǎn)時得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果和和基于熒光標(biāo)記方法結(jié)果相一致。他們使用PI和Hoechst標(biāo)記細(xì)胞。
鼠成纖維細(xì)胞L929接種在μ-slide 上，腫瘤藥物依托泊苷etoposide(100μM)處理細(xì)胞，使用激光全息細(xì)胞分析系統(tǒng)(M3)分析細(xì)胞的死亡，并與臺盼藍(lán)染色法進(jìn)行比較。圖1中左圖為臺盼藍(lán)染色結(jié)果，右圖為全息結(jié)果，細(xì)胞越白，細(xì)胞越厚。死細(xì)胞是圓的，薄的。兩種方法得到的結(jié)果是一樣的。
使用激光全息細(xì)胞成像用來分析細(xì)胞活力，無需不同時間點(diǎn)進(jìn)行細(xì)胞臺盼藍(lán)染色，就可以實(shí)時得到細(xì)胞活力數(shù)據(jù)。
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