全血基因組DNA提取試劑盒（50次）-說(shuō)明書
全血基因組DNA提取試劑盒（50次）
試劑盒組成：
1．溶液A 25ml 5×STMT(用時(shí)按體積比1：4 用滅菌雙蒸水稀釋)
2．溶液B 17ml
3. 溶液C 0.6ml RNase A
4．溶液D 44ml
5. 溶液E 1.25ml Resin（用時(shí)充分混勻）
6. 溶液F 30ml 洗液(用時(shí)加入40ml無(wú)水酒精，并在瓶蓋“口”中做標(biāo)記)
7．溶液G 5ml TE 緩沖液
實(shí)驗(yàn)步驟:
(一)新鮮抗凝血或冷凍抗凝血
1．取300μl 全血,加入900μl 溶液A，溫和混勻5～6 次。
2．室溫或冰浴10min，≥8000rpm 離心20～30 秒，棄上清。
注：1）若紅細(xì)胞溶解不完全，則沉淀物發(fā)紅，可再加900μl 溶液A，重復(fù)上述步驟一次。
2）若全血在使用之前被冷凍，則需重復(fù)步驟1、2 兩次。
3．加入300μl 溶液B，溫和振蕩或反復(fù)用移液器吸打白色沉淀物4～6 次，
加入10μl 溶液C，室溫放置10min。
4．加入800μl 溶液D，20μl 溶液E，混勻，室溫放置5min。
5．≥8000rpm 離心30s，棄上清。
6．加入500μl 溶液F,充分混勻，≥8000rpm 離心30～60s，棄上清。
7．重復(fù)步驟6。
8．≥12000rpm 離心1min，吸干剩余液體。室溫放置5～10min。
9．加入50～100μl 溶液G，混勻，50℃保溫5～10min，≥12000rpm 離心1min，吸取上清，
即為DNA。
(二)分離好的白細(xì)胞
1．取100μl 白細(xì)胞，按1：3 的比例直接加入溶液B，充分混勻，加入10μl 溶液C，室溫
放置10min。
2． 其余接（一）的步驟4。
注注意事項(xiàng)：
1. 用戶可視DNA 濃度高低，適當(dāng)調(diào)整溶液G 的量。
2. 此方法提取DNA 質(zhì)量非常高，適用于分子生物學(xué)任何實(shí)驗(yàn)要求，OD260/280≥1.5,一
般情況能達(dá)到1.7--1.8,若比值偏低，可能是溶血或儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
試劑盒組成：
1．溶液A 25ml 5×STMT(用時(shí)按體積比1：4 用滅菌雙蒸水稀釋)
2．溶液B 17ml
3. 溶液C 0.6ml RNase A
4．溶液D 44ml
5. 溶液E 1.25ml Resin（用時(shí)充分混勻）
6. 溶液F 30ml 洗液(用時(shí)加入40ml無(wú)水酒精，并在瓶蓋“口”中做標(biāo)記)
7．溶液G 5ml TE 緩沖液
實(shí)驗(yàn)步驟:
(一)新鮮抗凝血或冷凍抗凝血
1．取300μl 全血,加入900μl 溶液A，溫和混勻5～6 次。
2．室溫或冰浴10min，≥8000rpm 離心20～30 秒，棄上清。
注：1）若紅細(xì)胞溶解不完全，則沉淀物發(fā)紅，可再加900μl 溶液A，重復(fù)上述步驟一次。
2）若全血在使用之前被冷凍，則需重復(fù)步驟1、2 兩次。
3．加入300μl 溶液B，溫和振蕩或反復(fù)用移液器吸打白色沉淀物4～6 次，
加入10μl 溶液C，室溫放置10min。
4．加入800μl 溶液D，20μl 溶液E，混勻，室溫放置5min。
5．≥8000rpm 離心30s，棄上清。
6．加入500μl 溶液F,充分混勻，≥8000rpm 離心30～60s，棄上清。
7．重復(fù)步驟6。
8．≥12000rpm 離心1min，吸干剩余液體。室溫放置5～10min。
9．加入50～100μl 溶液G，混勻，50℃保溫5～10min，≥12000rpm 離心1min，吸取上清，
即為DNA。
(二)分離好的白細(xì)胞
1．取100μl 白細(xì)胞，按1：3 的比例直接加入溶液B，充分混勻，加入10μl 溶液C，室溫
放置10min。
2． 其余接（一）的步驟4。
注注意事項(xiàng)：
1. 用戶可視DNA 濃度高低，適當(dāng)調(diào)整溶液G 的量。
2. 此方法提取DNA 質(zhì)量非常高，適用于分子生物學(xué)任何實(shí)驗(yàn)要求，OD260/280≥1.5,一
般情況能達(dá)到1.7--1.8,若比值偏低，可能是溶血或儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
標(biāo)簽：
全血基因組DNA提取試劑盒（50次）
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