γδ T 細(xì)胞：概述與擴增培養(yǎng)

摘要： 本文全面闡述了 γδ T 細(xì)胞的基本特性，包括其在免疫系統(tǒng)中的獨特地位、細(xì)胞表面標(biāo)志物、組織分布等方面的概述，以及目前常用的擴增培養(yǎng)方法及其原理、應(yīng)用前景和面臨的挑戰(zhàn)，旨在為深入研究 γδ T 細(xì)胞在免疫治療等領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

一、γδ T 細(xì)胞概述
（一）γδ T 細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中的地位

γδ T 細(xì)胞是 T 淋巴細(xì)胞的一個獨特亞群，與傳統(tǒng)的 αβ T 細(xì)胞在抗原識別和免疫功能方面存在顯著差異。它們在固有免疫和適應(yīng)性免疫之間起著橋梁作用，兼具快速應(yīng)答和免疫記憶的特性。γδ T 細(xì)胞能夠在病原體入侵的早期階段迅速被激活，無需依賴主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子的抗原提呈，這使得它們在抵御感染方面具有獨特的優(yōu)勢，能夠?qū)Χ喾N病原體，如細(xì)菌、病毒和寄生蟲等產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

（二）細(xì)胞表面標(biāo)志物

γδ T 細(xì)胞表達特定的 TCRγ 和 TCRδ 鏈，以此區(qū)別于 αβ T 細(xì)胞。不同的 γδ T 細(xì)胞亞群還表達其他特征性的表面分子，例如，Vγ9Vδ2 T 細(xì)胞亞群通常表達 CD27 和 CD45RO 等標(biāo)志物。這些表面標(biāo)志物不僅有助于識別 γδ T 細(xì)胞，還與它們的功能分化和活化狀態(tài)密切相關(guān)。

（三）組織分布

γδ T 細(xì)胞廣泛分布于人體的多種組織和器官中，包括外周血、皮膚、腸道黏膜、肝臟、脾臟等。在不同的組織微環(huán)境中，γδ T 細(xì)胞的數(shù)量、亞群組成和功能有所不同。例如，在皮膚中，γδ T 細(xì)胞主要參與皮膚的免疫監(jiān)視和創(chuàng)傷修復(fù)；而在腸道黏膜，它們對于維持腸道微生物群落的平衡以及抵御腸道病原體感染起著關(guān)鍵作用。

二、γδ T 細(xì)胞擴增培養(yǎng)
（一）擴增培養(yǎng)的意義

擴增培養(yǎng) γδ T 細(xì)胞對于深入研究其生物學(xué)功能以及開發(fā)基于 γδ T 細(xì)胞的免疫治療策略具有至關(guān)重要的意義。通過體外擴增，可以獲得大量具有特定功能和活性的 γδ T 細(xì)胞，為基礎(chǔ)研究提供充足的細(xì)胞來源，同時也為臨床免疫治療中 γδ T 細(xì)胞的回輸治療奠定基礎(chǔ)。

（二）常用的擴增培養(yǎng)方法
1、基于抗原刺激的擴增方法
1）磷酸化抗原刺激：對于 Vγ9Vδ2 T 細(xì)胞亞群，使用磷酸化抗原如異戊烯焦磷酸（IPP）及其類似物進行刺激是一種常用的擴增方法。IPP 可與細(xì)胞內(nèi)的抗原呈遞分子結(jié)合，激活 γδ T 細(xì)胞的 TCR 信號通路，促使其增殖。這種方法能夠特異性地擴增 Vγ9Vδ2 T 細(xì)胞，且擴增后的細(xì)胞具有較強的抗腫瘤活性。例如，在腫瘤免疫治療研究中，將從外周血分離得到的 γδ T 細(xì)胞與 IPP 共同培養(yǎng)，經(jīng)過一段時間后，γδ T 細(xì)胞數(shù)量可顯著增加，并且對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力明顯增強。

2）人工合成抗原刺激：一些人工合成的抗原肽也可用于 γδ T 細(xì)胞的擴增。這些抗原肽能夠模擬天然抗原與 γδ T 細(xì)胞 TCR 的相互作用，引發(fā)細(xì)胞的活化和增殖。與磷酸化抗原相比，人工合成抗原具有更好的穩(wěn)定性和可操作性，能夠在不同的實驗條件下進行 γδ T 細(xì)胞的擴增培養(yǎng)。

2、細(xì)胞因子介導(dǎo)的擴增方法

1）IL - 2 刺激：白細(xì)胞介素 - 2（IL - 2）是 γδ T 細(xì)胞擴增培養(yǎng)中常用的細(xì)胞因子之一。IL - 2 能夠促進 γδ T 細(xì)胞的存活、增殖和分化。在培養(yǎng)體系中添加適量的 IL - 2，可以維持 γδ T 細(xì)胞的生長狀態(tài)，使其不斷分裂增殖。然而，單獨使用 IL - 2 進行擴增可能會導(dǎo)致 γδ T 細(xì)胞的功能異質(zhì)性增加，因此常與其他抗原或細(xì)胞因子聯(lián)合使用。
2）IL - 15 和 IL - 21 聯(lián)合應(yīng)用：IL - 15 和 IL - 21 與 IL - 2 具有協(xié)同作用。IL - 15 有助于 γδ T 細(xì)胞的長期存活和自我更新，而 IL - 21 則能夠調(diào)節(jié) γδ T 細(xì)胞的分化方向，增強其細(xì)胞毒性功能。將這三種細(xì)胞因子聯(lián)合應(yīng)用于 γδ T 細(xì)胞的擴增培養(yǎng)，可以獲得數(shù)量更多、功能更強大的 γδ T 細(xì)胞群體。例如，在一項針對腫瘤免疫治療的細(xì)胞培養(yǎng)研究中，采用 IL - 2、IL - 15 和 IL - 21 聯(lián)合培養(yǎng)體系，擴增后的 γδ T 細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷效率比單獨使用 IL - 2 擴增的細(xì)胞提高了數(shù)倍。

（三）擴增培養(yǎng)面臨的挑戰(zhàn)

1、細(xì)胞純度和功能維持：在擴增過程中，如何確保擴增得到的 γδ T 細(xì)胞具有高純度，避免其他細(xì)胞類型的污染是一個關(guān)鍵問題。同時，隨著擴增倍數(shù)的增加，γδ T 細(xì)胞的功能可能會逐漸下降，如細(xì)胞毒性降低、免疫調(diào)節(jié)功能失衡等。因此，需要優(yōu)化擴增培養(yǎng)條件，以維持 γδ T 細(xì)胞的功能特性。
2、大規(guī)模擴增的成本和技術(shù)要求：對于臨床應(yīng)用而言，往往需要大規(guī)模擴增 γδ T 細(xì)胞。然而，目前的擴增方法在大規(guī)模培養(yǎng)時面臨著成本高昂和技術(shù)復(fù)雜的挑戰(zhàn)。例如，一些抗原和細(xì)胞因子的價格昂貴，且大規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制難度較大。此外，大規(guī)模擴增所需的設(shè)備和培養(yǎng)體系也需要進一步優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，以提高擴增效率和降低成本。

γδ T 細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，其獨特的生物學(xué)特性和免疫功能使其在免疫治療等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。通過不斷優(yōu)化擴增培養(yǎng)方法，克服目前面臨的挑戰(zhàn)，有望實現(xiàn) γδ T 細(xì)胞在臨床治療中的廣泛應(yīng)用，為多種疾病的治療帶來新的突破。

上海逐典細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品

一．細(xì)胞因子

產(chǎn)品特性

• 高生物活性
• 偏向性
  二．PSCprofTM人多能干細(xì)胞消化液

產(chǎn)品特性

• 溫和高效，傳代存活率高
• 可進行單細(xì)胞傳代
  三．TryPLUS細(xì)胞消化液

產(chǎn)品特性

• DMF備案
• 非動物來源
• 即開即用，方便快捷
• 消化溫和，消化后細(xì)胞活性高
• 無需胰酶抑制劑，稀釋即可終止