M2生物芯片點樣儀助力抗體共價偶聯過程及流動特性研究

瀏覽次數：899　發布日期：2024-6-12　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

文獻速遞|M2生物芯片點樣儀助力抗體共價偶聯過程及流動特性研究

【Preparative Biochemistry & Biotechnology】Study on covalent coupling process and flow characteristics of antibody on the surface of immunoassay microfluidic chip
抗體在免疫分析微流控芯片上偶聯特性以及流動特性分析

微流控芯片集成了樣品反應、處理和分離整個過程，與傳統檢測方式相比，具有體積小、試劑消耗少、檢測時間短、操作方便等諸多特點。因此，被廣泛應用在分子診斷和即時檢測(POCT)領域。

微流控芯片的免疫檢測反應是一個動態過程，需要將反應物持續運送到固相載體表面。目前，大多研究集中在免疫反應的底物上，而對反應物的流量以及流速等特性的研究十分有限。如何結合微流控芯片內部結構得到最佳流速的免疫檢測，成為芯片表面修飾技術急需解決的問題之一。本文研究了幾種聚苯乙烯亞基表面修飾的工藝，用于闡明抗體固定與流速對免疫反應效果的影響。抗體采用共價結合的方式進行固定，基于酶聯免疫吸附原理進行熒光定量檢測及免疫應答過程的評估。另外，以降鈣素原為例，系統地研究了抗體共價偶聯過程和流動特性對免疫檢測結果的影響，為免疫檢測微流控芯片的結構設計提供理論基礎。

作者單位：清華大學精密/超精密制造裝備與控制重點實驗室，清華大學天津先進裝備研究院
期刊：Preparative Biochemistry & Biotechnology
發表年份：2021年
樣本：蛋白抗體
芯片類型：自制微流控芯片
芯片點樣儀：M2公司iTWO 200生物芯片點樣儀

芯片設計和免疫反應原理如圖1所示：使用德國M2生物芯片點樣儀將標記物(熒光微球)點印在反應區，特異性抗體點印在測試區(僅與感興趣的抗原結合)，非特異性抗體點印在對照區(只與標記物或抗原結合)。當含有抗原的血液流經反應區時，抗原在反應區與標記物結合，通過檢測區后，標記抗原被特異性抗體捕獲，形成“抗體-抗原-抗體免疫復合物”，從而產生熒光，當血液流入控制區域時非特異性抗體捕獲未結合的標記抗體。最后使用熒光定量分析儀進行熒光信號分析。

結果顯示：對血液中降鈣素原檢測過程中，研究人員發現平均流速約為0.2 mm/s時免疫反應信號最強；與氨基和醛基修飾相比，環氧基修飾的芯片抗體免疫效率最高，對于小分子基團修飾的芯片，引入聚L -賴氨酸可以增加抗體的固定數量。

原文鏈接：https://doi.org/10.1080/10826068.2021.1958344

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