介紹
準確、快速地處理通過拭子和FTA卡基質(zhì)收集的血液或口腔樣本對法醫(yī)實驗室的高效運作至關重要。GlobalFiler™ Express Kit*是一種STR多重檢測方法，能夠從拭子和FTA卡打孔器以及其他的參考樣本中直接擴增。本應用說明介紹了如何使用FORMULATRIX公司的MANTIS系統(tǒng)將GlobalFiler™ Express Kit的預混液分配到帶有經(jīng)處理的口腔FTA卡打孔器的擴增板上。
 
材料和方法
在添加 GlobalFiler™ Express Kit 試劑之前，將經(jīng)處理且?guī)в袠悠返?.2 mm紙盤添加到所需數(shù)量的反應孔中。根據(jù)供應商的說明指導對GlobalFiler™ Express Kit 試劑進行處理，用于對經(jīng)處理的FTA卡的 26次 循環(huán)直接擴增。
 
簡而言之，通過將每個樣品的以下體積組合在一起來制備預混液：6.0 μL 預混液、6.0 μL 引物組和 3.0 μL 低 TE 緩沖液。使用MANTIS 液體處理器（圖 1）將 15 μL 預混液分配到 MicroAmp™ 光學 96 孔反應板上。隨后的擴增產(chǎn)物在 Applied Biosystems 3500xl 基因分析儀上進行處理，并使用 GeneMapper™ ID-X 軟件 v1.4 進行分析。

結果

在 17 次對經(jīng)處理的口腔FTA卡打孔器的測試中，每次均使用 26 次循環(huán) PCR 擴增生成完整圖譜（圖 2）。 所有擴增對照（兩個陽性和兩個陰性對照）也得到了預期的結果。

結論

GlobalFiler™ Express PCR 擴增試劑盒和FORMULATRIX公司的MANTIS 液體處理器的組合創(chuàng)建了一個用于生成PCR圖譜的高效系統(tǒng)。 GlobalFiler™ Express的化學反應免除了在擴增前提取和定量 DNA的需要。MANTIS強大且精確地將 GlobalFiler™ Express 預混液自動分配到擴增板上，并通過簡單易用的軟件控制最小死體積。自動打孔機器人和 LIMS 系統(tǒng)的集成構成了一個完整的系統(tǒng)，用于處理具有完整監(jiān)管鏈的FTA卡打孔器。