細(xì)胞培養(yǎng)“板瓶皿”在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的應(yīng)用及注意事項
培養(yǎng)細(xì)胞時，何時使用培養(yǎng)瓶，何時使用孔板培養(yǎng)，取決于實驗?zāi)康暮托枰?strong>一般情況下，原代細(xì)胞培養(yǎng)和常規(guī)傳代培養(yǎng)使用培養(yǎng)瓶，可獲得大量實驗用細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶
由高品質(zhì)聚苯乙烯（PS）材料，以超精密模具及全自動化生產(chǎn)工藝生產(chǎn)，產(chǎn)品應(yīng)用于實驗室細(xì)胞培養(yǎng)，優(yōu)異的光學(xué)性質(zhì)便于顯微觀察，表面經(jīng)過TC處理，細(xì)胞貼壁效果更佳。
TIPS：什么是TC處理？
TC處理表示該器皿經(jīng)過表面的改性處理，適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。而懸浮生長的細(xì)胞，就不一定需要這樣經(jīng)過特殊處理過的器皿。但經(jīng)過表面的改性處理后的細(xì)胞培養(yǎng)皿等一般也適合懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
大部分動物細(xì)胞需要貼附在一個固相界面上才能生長。而只有親水的固相界面，細(xì)胞才能貼附。
最早的細(xì)胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的，不經(jīng)過特殊的處理，普通的細(xì)胞就可以貼附生長。而聚苯乙烯透光性能好，具有較好的強度和易塑性，并且沒有毒性，成為一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿和細(xì)胞培養(yǎng)板等一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材的首選材料，然而聚苯乙烯表面是疏水的，所以需要經(jīng)過表面的改性處理，增強細(xì)胞吸附與蛋白結(jié)合的能力，變成親水后才能適用于細(xì)胞培養(yǎng)。
1 、如何選擇培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞
首先，根據(jù)期望獲得的細(xì)胞產(chǎn)量來選擇，培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的，例如T25、T75、T175，數(shù)字就是表面積，25就是25平方厘米，如此類推；其次，根據(jù)實驗操作熟練程度來選擇，不管是換液、傳代、還是收獲細(xì)胞，培養(yǎng)皿的操作比較方便，但因為其開口很大，所以容易污染，如果你是新手，不建議直接用培養(yǎng)皿養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)皿
最后，如果選擇培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，還應(yīng)該盡量選擇有斜肩設(shè)計、帶透氣孔瓶蓋的型號。
前者可以避免培養(yǎng)瓶平放后，過多的培養(yǎng)基接觸瓶蓋造成污染，后者可以保持內(nèi)外的二氧化碳濃度一致。
如果瓶蓋不透氣，那在放進培養(yǎng)箱時，應(yīng)擰松一圈，以便內(nèi)外氣體能順利交換。
2 、以細(xì)胞為載體或?qū)ο蟮膶嶒炇褂眉?xì)胞培養(yǎng)板較好，如藥敏試驗、MTT（96孔培養(yǎng)板）、免疫組化（6孔培養(yǎng)板）等。
細(xì)胞培養(yǎng)板
選擇好合適的孔板后，在培養(yǎng)階段，有2點注意事項：
-
多孔板會帶板蓋，但其密封性不好，在培養(yǎng)箱內(nèi)會造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高，進而影響細(xì)胞生長速率。可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位，并采用添加培養(yǎng)基來代替。
NEST EDGE細(xì)胞培養(yǎng)板EDGE細(xì)胞培養(yǎng)板周圍具有溝槽設(shè)計，通過改變原有96孔板的結(jié)構(gòu)，在最外側(cè)孔的外側(cè)設(shè)計了不同寬度及厚度的槽形結(jié)構(gòu)，因此達到最大程度消除邊緣效應(yīng)的目的，同時又保證了細(xì)胞培養(yǎng)的最佳狀態(tài)。提高了培養(yǎng)板的溫度穩(wěn)定性和均衡的濕度環(huán)境，從而減 少或消除了邊緣效應(yīng)，保證了細(xì)胞生長的均一性。
-
當(dāng)細(xì)胞種入孔內(nèi)以后，不應(yīng)該再進行過多的震動，例如晃動、抖動培養(yǎng)板，而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。
-
如果培養(yǎng)箱由多人共用，還應(yīng)該考慮頻繁開關(guān)箱門、拿放孔板造成的震動，這些不利因素都應(yīng)該盡量減少。
