聽說很多實驗人員在進行PCR實驗的時候都會遇到各種各樣的問題，今天Bee仔就挑幾個經常遇到問題來跟大家分享一點小經驗~都是重點，要做筆記的哦~

PCR管底座適配性影響

問題現象

在進行PCR實驗之前，由于需要確保PCR八聯管或單管的管蓋蓋合緊密，部分實驗員可能會使勁按壓管蓋，此時，如果PCR底座的尺寸與PCR管不太適配，就會出現PCR管難以從底座取出的情況。

這個時候如果取出不當，就很容易會造成管蓋松動，后續造成樣品被污染或者實驗室被污染的情況。

 

解決方法

遇到上述情況，只要選擇合適的PCR底座就可以解決啦！Beebio PCR管專用底座適配市面通用的PCR管，不松不緊剛剛好，使勁按壓后也能輕松取出。

   
問題現象

在做PCR實驗的時候，部分實驗員可能會遇到：加熱時管蓋被頂開造成樣品蒸發、PCR管變形、實驗后取出PCR管時由于內外壓力差被頂開管蓋等現象。

 

解決方法

①在使用熱蓋可調的PCR儀的時候，如果出現管蓋被頂開的情況，則需要在實驗前調整好熱蓋的高度，以剛好可以壓緊PCR管為宜，如果高度太高，就有可能會出現實驗過程中管蓋被管內氣流頂出，進而造成管內液體蒸發影響實驗結果。如果高度太低把PCR管壓太緊，就有可能導致PCR管在壓力和高溫下變形。至于具體多少是合適的高度，建議找PCR儀技術人員進行確認哦。

②在做少量PCR管反應的時如出現PCR管變形的情況，在有樣品管支撐架的情況下，在加熱模塊上放上樣品管支撐架（如下圖）就可以避免熱蓋壓力太大把管子壓變形。
 

圖2.樣品管支撐架

如果沒有樣品支撐架，則可以在加熱模塊的4個角落分別放上1個PCR管（如下圖3所示），或者在左右兩側各放置一條PCR八聯管（如下圖4所示）平衡熱蓋的壓力，以防止熱蓋壓力導致PCR單管變形。

 

圖3.四個角落放置PCR管

 

圖4.兩側放置PCR八聯管
 

③如實驗后取出PCR管時出現管蓋被頂開的情況，可在實驗后確保PCR儀降到室溫后再打開熱蓋，這樣就可以避免PCR 管內外溫差太大，內部氣流把管蓋頂開造成實驗室污染。

這里建議將PCR反應最終一步的結束溫度設為4度，可以有效避免上述情況哦~
 

PCR管實驗后取出指南

問題現象

由于經過長時加熱加壓，管體會變得難以從加熱模塊上取出，這個時候如果直接按住管蓋兩端取出，容易出現頭尾開蓋的情況。（如下圖5）

 

解決方法

在取管前，左右輕搖管體（如下圖6），將管體搖松再取下PCR管。

圖6.左右輕搖后取出

也可以選擇前后/管中握住管身取管（如下圖7、8）。

圖7.選擇前/后管

圖8.同時握住管身后取出
 

Bee仔總結

以上就是Bee仔此次帶來的PCR管操作指南啦，你平時實驗中還會遇到什么問題呢？可以在私信告訴Bee仔哦，下次說不定就給你出個指南啦~