外泌體（Exosomes）是一種能被機體內大多數細胞分泌的直徑大約為30-150nm的微小膜泡，在體液中廣泛存在，外泌體攜帶和傳遞重要的信號分子，參與細胞活動的重要調控。
 

圖1 外泌體示意圖（圖片來源于網絡，僅供學習參考用）

2013年美國科學家Rothman、Schekmam以及德國科學家Sudhof因發現細胞內部外泌體合成運輸調控機制聯合獲得了諾貝爾生理學與醫學獎，他們的發現使外泌體的研究到達了全新的高度。截止2023年7月，全球共有118個國家科研工作者從事外泌體研究，相關文章發表趨勢逐年攀升。
 

圖2 外泌體研究現狀

外泌體作為干細胞分泌的囊泡，攜帶有來自干細胞的某些蛋白質、脂質、DNA及RNA等生物活性物質，干細胞所分泌的外泌體具有抗炎、抗細胞凋亡、促進細胞再生等作用，作為無細胞治療的新寵，外泌體有免疫原性低，更穩定，更好保存，易于質控的優勢。
 

外泌體提取方法：差速離心法、密度梯度離心、超濾離心、磁珠免疫法、PEG-base沉淀法、色譜法以及試劑盒抽提法，這些試劑盒不需要特殊設備，隨著產品技術的提升，提取效率和純化效果逐漸提高，因而逐漸取代超速離心法并推廣開來。
 

外泌體的常用鑒定方法有三種：透射電鏡法、納米顆粒跟蹤分析法及分子標志物檢測（至少3個陽性標志物、1個陰性標志物）。
 

圖3 外泌體鑒定圖（圖片來源于網絡，僅供學習參考用）

外泌體幾乎可以與任何疾病相關聯，成為疾病標志物、疾病機理、藥物開發等研究的創新熱點。目前clinicaltrials.gov中有關外泌體的臨床試驗研究共163項，主要涉及各種癌癥、皮膚損傷、抗衰老、多囊卵巢綜合征、干眼癥等相關研究。
 

在外泌體研究中，如果使用胎牛血清培養細胞、通過收集上清液來提取外泌體進行后續實驗，胎牛血清中的牛源外泌體會對實驗分析造成極大的干擾。無外泌體血清應運而生。
 

切勿直接將血清從-20°C進入37°C解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝集而出現沉淀，置于2-8℃融化，然后再室溫下使之全融，解凍過程中應輕輕的搖晃均勻。血清在解凍過程中可能會出現少量絮狀或片狀析出物（鏡檢形狀類似小黑點），主要是血清中脂蛋白的變形或是纖維蛋白析出，并不影響血清本身的質量，可使用0.45um過濾器過濾即可。