黃萎病是造成世界棉花產量和品質降低的主要病害之一，研究棉花黃萎病的抗病機制及相關基因可以大大推進棉花產業的發展。在植物抗病過程中，多種蛋白質、酶的相互合作，共同完成了植物抗病信號的產生和傳遞。泛素化修飾系統是真核生物體內主要的蛋白質調控路徑，廣泛參與了對生物體內大多數蛋白質的修飾降解行為。近年來研究發現，眾多E3泛素連接酶參與了不同物種對相應病原菌的抗性調節，所以研究棉花中E3泛素連接酶對棉花黃萎病的抗病調控機制，鑒定抗病基因可為棉花抗病分子育種提供理論基礎和基因資源。
  Qin, T., Liu, S., Zhang, Z. et al. GhCyP3 improves the resistanceof cotton to Verticillium dahliae by inhibiting the E3 ubiquitin ligaseactivity of GhPUB17. Plant Mol Biol 99, 379–393 (2019).
doi：https://doi.org/10.1007/s11103-019-00824-y

2019年，Plant Molecular Biology 雜志在線發表了華中農業大學作物遺傳改良國家重點實驗室朱龍付團隊完成的題為“GhCyP3 improves theresistance of cotton to Verticillium dahliae by inhibiting the E3 ubiquitinligase activity of GhPUB17”的研究論文，報道了棉花中U-box E3泛素連接酶GhPUB17對棉花黃萎病的抗病調節機制，GhPUB17可以被具有抗真菌活性的GhCyP3抑制，并作為負調節劑參與棉花抗黃萎病的調控過程。

該研究首先進行了一系列生理生化反應鑒定了棉花中具有泛素化活性的U-box E3連接酶GhPUB17的功能，發現其作為負調控劑參與了棉花對黃萎病菌的免疫反應。為了進一步研究GhPUB17的調控機制，尋找靶標蛋白，該研究利用酵母雙雜交實驗（Y2H）分析鑒定發現GhCyP3蛋白可與GhPUB17發生相互作用，并利用Princeton Instruments公司的Lumazone Plyon 2048B設備進行證實，結果顯示只有在GhPUB17-nLUC和GhCyP3-cLUC共表達后才能捕獲熒光素酶信號，而其他組合則無法捕獲，這說明GhCyP3是GhPUB17的潛在靶標蛋白。然后，該研究通過體外抗病性測試等一列生理生化實驗進一步研究了GhCyP3在棉花抗黃萎病調控中的作用，發現GhCyP3具有抗真菌活性，并且可通過與GhPUB17的相互作用以抑制其活性，提高棉花對黃萎病的抗性，進而完整揭示了GhPUB17對棉花抗黃萎病的調控機制。

利用生物發光研究GhPUB17與GhCyP3的相互作用

以上結果表明，通過Princeton Instruments公司的Lumazone系列設備可以直觀清晰地檢測到蛋白間的相互作用，有力地驗證了棉花中的U-box E3連接酶GhPUB17與GhCyP3蛋白的相互作用，揭示了GhPUB17對棉花抗黃萎病的調控機制。

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