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淺談中藥行業LC及應用常見問題解答

瀏覽次數:1534 發布日期:2022-5-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
做中藥分析,因為中藥品種太多,樣品也比較臟,液相遇到最多的問題就是壓力過高,首先要確認是哪個部件造成的,可以用兩通替換掉色譜柱,用純水1ml流速看一下系統壓力,一般LC-20AT/AD的壓力在1MPa以下就是正常的。既然液相系統沒有堵塞,那么就是緩沖鹽或者某些雜質把色譜柱堵了,這時就需要用10%甲醇水長時間沖洗,可以嘗試用0.2ml/min流速沖一晚,記得不要接檢測器,防止雜質堵塞流通池,可以在色譜柱出口接一個燒杯,一般情況下不建議反沖。

一些品種實驗時的注意事項

這里選取一些有代表性的品種,分別是:制川烏、枳實,薏苡仁。

首先說一說制川烏,它代表了流動相中含四氫呋喃的品種,四氫呋喃的極性較弱,洗脫能力較強,而且四氫呋喃溶解性較強,會對色譜柱填料造成不可逆的損傷。

 

實驗時要注意色譜柱平衡時間需要更長(1小時以上),梯度時間程序回到初始比例后的時間也要設定長一些,做完實驗后沖洗時間要更長,不然容易發生堵塞情況。建議“專柱專用",用過四氫呋喃的色譜柱不要再做其它實驗。

然后聊一聊枳實,它代表了流動相中含離子對試劑(十二烷基磺酸鈉,辛烷磺酸鈉等)的品種。離子對試劑是由強親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對。因此,可用于同時分離帶電分子和非帶電分子。



實驗時要注意離子對試劑盡量和有機相混在一起配制,平衡時間需要更長。枳實的對照品和樣品溶液的溶劑都是水,所以要做到臨用新制。不然可能會發生溶劑效應或者保留時間不一致的現象。

最后講一講薏苡仁,薏苡仁用到的是蒸發光檢測器,使用的是乙腈和二氯甲烷流動相。二氯甲烷與水不能互溶,所有二氯甲烷所接觸的容器都要保證干燥。



實驗時要注意實驗全程不能接觸水,包括流動相瓶、液相管路(除了洗針液),色譜柱。此品種建議配制混合流動相,分析時先用純乙腈沖洗系統1小時,然后換成流動相平衡30分鐘直至基線穩定再進樣,使用250mm色譜柱時建議在藥典允許范圍內調整流動相比例至乙腈-二氯甲烷(65:35),如果有水,可能會發生不出峰的情況。建議分配一根色譜柱給此品種專用,實驗結束后用純乙腈沖洗系統1小時后再取下。


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