天天干亚洲_99久久免费国_亚洲国产精品成人久久久软件_亚洲成av人**亚洲成av**_精品中文字幕在线AⅤ_男女真实毛片视频图片

English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > PCR原理、PCR擴(kuò)增影響因素及預(yù)防詳解

PCR原理、PCR擴(kuò)增影響因素及預(yù)防詳解

瀏覽次數(shù):2747 發(fā)布日期:2022-5-10  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

PCR簡介

聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量,以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析的一種反應(yīng)。
 

PCR擴(kuò)增原理

核酸降解是DNA/RNA分子中的堿基和戊糖間的氮糖苷鍵,或磷酸二酯鍵在物理因素、化學(xué)因素和生物因素等作用下發(fā)生水解,使DNA/RNA鏈發(fā)生斷裂。

▲ 圖一:PCR原理反應(yīng)示意圖

▲ 圖二:PCR反應(yīng)過程中溫度變化圖

實時熒光定量PCR原理

通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實時監(jiān)控反應(yīng)過程,結(jié)合相應(yīng)軟件可以對結(jié)果進(jìn)行分析,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析,計算待測樣本的初始模板濃度。

▶  初始DNA濃度越高,熒光達(dá)到某一值(閾值)時所需要的循環(huán)數(shù)越少(Cq值)。

▶  Log濃度與循環(huán)數(shù)成線性關(guān)系,根據(jù)樣品擴(kuò)增到閾值的循環(huán)數(shù)與已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品作出的標(biāo)準(zhǔn)曲線對比就可以計算出該樣品的起始拷貝數(shù)。

影響PCR擴(kuò)增的因素

▶  模板間的交叉污染。

▶  PCR試劑的污染。

▶  PCR產(chǎn)物的污染。

防止污染的預(yù)防操作

❶ 永遠(yuǎn)要設(shè)置NTC(No Template Control)對照,一個不含有模板DNA但含有PCR體系中所有其他成分的對照。如果不能在污染的第一時間發(fā)現(xiàn),會導(dǎo)致后續(xù)一系列的數(shù)據(jù)無法使用。

❷ 準(zhǔn)備PCR體系的移液器要專用,千萬不能用吸取過PCR產(chǎn)物的移液器去準(zhǔn)備PCR體系。

❸ 打開離心管前先離心,開管動作要輕,以防管內(nèi)液體濺出。

❹ 最好在加完其他反應(yīng)成分再加入模板。

❺ 實驗結(jié)束后及時清理臺面。

出現(xiàn)污染后的解決辦法

❶ 更換試劑:更換新的試劑和水,用確保無污染的移液器分裝備用。

❷ 清潔所有可能的污染源:實驗臺面,離心機,門把手等。

❸ 實驗過程更加小心,采用前面提到的各種防止污染的方法。

CieloTM實時熒光定量PCR系統(tǒng)

Harness of the power of qPCR

 

☑  數(shù)據(jù)可靠性:連續(xù)1000次實驗后,結(jié)果高度一致。

☑  應(yīng)用靈活性:提供多種qPCR應(yīng)用分析。

☑  流程智能化:中英文用戶界面,觸控操作,可多機聯(lián)用。

☑  在線便捷性:主機可獨立運行qPCR程序,數(shù)據(jù)可USB、Wi-Fi等網(wǎng)絡(luò)傳輸。

發(fā)布者:艾普拜生物科技(蘇州)有限公司
聯(lián)系電話:0512--86860010
E-mail:info@aperbio.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網(wǎng)友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 成人爽a毛片在线视频淮北 国产综合在线播放 | 国产精品久久一区二区三区不卡 | 夜夜爽妓女8888888视频 | 国产一级录像 | 成人免费毛片高清视频 | 日韩四区 | 亚洲精品第5页 | 精品久久香蕉国产线看观看亚洲 | 国产精品不卡二区三区综合 | 免费av观看网站 | 久久av片 | 国产孕妇视频在线播放 | 免费一级毛片在线播放视频老 | 18禁免费无码无遮网站国产 | 国产乱妇乱子视频在线播放国产 | 国产精品白丝jk黑袜喷水视频 | 国产观看一区二区 | 精品视频一区二区 | 偷拍激情视频一区二区三区 | 日本bbw大码乱熟 | 精品国产黄| 亚洲AV福利院在线观看 | 美女久久久久久久久久 | 足交在线观看 | 久久精品久久精品 | 91嫩草人人| 中文字幕无码av福利网 | 久久精品国产亚洲αv忘忧草 | 深夜福利视频免费观看 | 99噜噜噜在线播放 | a级毛片三个男人一女 | 国产成人啪精品网站 | 国内老司机精品视频在线播出 | 丁香婷婷综合在线麻豆 | av在线视屏 | japanese极品少妇 | 欧美曰韩精品一区二区三区 | 欧美rb视频 | 国内成人综合 | 与丰满少妇做爽视频 | 高清有码国产一区二区 |