我們在實驗過程中，使用拉制儀時難免會遇到各種疑問：

水平拉制儀和垂直拉制儀有什么不同？哪個更好用呢？
玻璃微電極的阻抗如何保持穩(wěn)定？
使用到什么程度需要更換加熱片？……

別擔心，本期九大常見問題解答，讓你的困擾輕松解決！

Q1：拉制儀的拉制原理是什么？
依據(jù)加熱源而分，常見加熱源為鉑銥合金加熱片，較少為二氧化碳激光。固定玻璃管后，通過對鉑銥合金加熱片接通恒定電流產(chǎn)生高溫從而融化插入合金片中的毛細玻璃管；通過重力作用或者施加額外拉力將中間融化的毛細玻璃管向兩側(cè)分步拉斷成尖端對稱的兩個玻璃微電極；通過調(diào)節(jié)拉制參數(shù)（熱量、拉力、速度、定時/延時），拉制出不同尖端形狀的玻璃微電極。

Q2：可以在哪些實驗場景中用到拉制儀？
場景一為電生理相關的刺激和記錄微電極的制備，主要是檢測離子通道微弱生物電信號的膜片鉗實驗；場景二為顯微注射實驗所用注射針的制備，包括細胞核注射、斑馬魚注射、線蟲注射、胞漿內(nèi)精子注射、病毒腦立體定位注射等；場景三為細胞選擇、采集、轉(zhuǎn)移及吸取所用微電極的制備；場景四為微流控芯片技術中液流管路及液流控制系統(tǒng)制備；場景五為新型印刷電路及3D打印技術中噴頭的制備等。

Q3：水平拉制儀和垂直拉制儀有什么區(qū)別？
垂直拉制儀，使用加熱絲并接通電流對玻璃管中部加熱并達到熔點，依靠重力的作用拉斷玻璃管。操作簡單，但拉制顯微注射用電極較為困難。

水平拉制儀，通常采用微控制器控制其拉制過程，將玻璃管兩端水平固定，加熱其中部，利用電動力或彈力作單次或多次拉制，玻璃管兩端同時受力從而拉斷。可通過調(diào)節(jié)拉制參數(shù)（熱量、拉力、速度、定時/延時），拉制出滿足更多不同需求的玻璃微電極。總體來說，水平拉制儀優(yōu)于垂直拉制儀，控制比較精確，拉出的電極參數(shù)比較穩(wěn)定，而且電極尖端口徑及錐體形狀變化較小。

Q4：提供的注射類拉制模板沒有滿足需求，如何調(diào)試參數(shù)獲得目標微電極？
主要方法是在使用拉制模板的基礎上對單個參數(shù)或多個參數(shù)進行調(diào)整。一般拉制儀提供多個實驗場景的拉制模板，涵蓋了膜片鉗實驗及各類顯微注射實驗。

變長調(diào)試：優(yōu)先增加速度、其次是熱量。注意觀察電極形態(tài)，當達到某一值后，電極形態(tài)不再發(fā)生變化，此時可同時增加速度和熱量。

變長變硬：①先調(diào)整長度，然后修剪；②同時改成定時模式，設置為1，拉力最好為0。

變短調(diào)試：優(yōu)先降低速度、其次是熱量。注意觀察電極形態(tài)，當達到某一值后，電極形態(tài)不再發(fā)生變化，此時可同時降低速度和熱量。

Q5：玻璃微電極的阻抗如何保持穩(wěn)定？
①儀器檢測：開機預熱十分鐘左右，檢查加熱片、玻璃管及噴氣孔的相對位置是否保持正確，測試軟化點后開啟夾鉗預熱模式。

②參數(shù)調(diào)試：首先膜片鉗微電極拉制一般是4步或5步循環(huán)；其次速度中值的調(diào)試能確保循環(huán)次數(shù)的穩(wěn)定，從而保證阻抗的穩(wěn)定。具體來說，以推薦參數(shù)為基礎，增加或減少速度，以得到不同的循環(huán)次數(shù)，找到循環(huán)4次和5次的速度區(qū)間，并得到對應的速度中值，測試循環(huán)4次和循環(huán)5次的速度中值對應的阻抗，并與目標阻抗比較，選擇阻抗更接近目標阻抗的速度中值進行調(diào)試。
 

Q6：不同型號的加熱片應該如何選擇呢？
以瑞沃德MP-500水平拉制儀為例，顯微注射類實驗推薦使用2545B型號，該加熱片最寬，便于拉出較長的尖端；顯微注射實驗與膜片鉗實驗（＞5MΩ）推薦使用3030B型號；膜片鉗實驗（1-10MΩ）推薦使用3025B型號，該加熱片最窄，便于拉出較短較硬的尖端。

Q7：使用到什么程度需要更換加熱片？
觀察到加熱片表面有明顯的變形，燒痕或劃痕等情況，可以考慮更換加熱片。根據(jù)使用頻繁程度，一般3-6個月亦可考慮更換。

Q8：什么時候需要測試軟化點呢？
軟化點的含義是能夠使加熱片產(chǎn)生足夠熱量從而軟化玻璃管的電流值。其中提及到兩個重要物件，加熱片及玻璃管。因此當使用的加熱片或者玻璃管的型號發(fā)生改變時均需要重新測試對應的軟化點。一般測試3次，取最大值即可。

Q9：干燥劑什么狀態(tài)下需要更換呢？
干燥劑干燥狀態(tài)下為藍色或者藍紫色，吸潮后變成粉紅色。當干燥劑大部分為粉紅色時（一般2/3時），更換干燥劑。干燥劑較多使用無水硫酸鈣。

*下期內(nèi)容為拉制儀常見耗材選購小貼士，持續(xù)關注呦