小伙伴們，我又來了~

本期給大家?guī)�來顯微鏡物鏡的知識。

啥是物鏡，我想地球人都知道~

物鏡是顯微鏡的靈魂所在，物鏡是影響清晰度的最重要部件，先來了解下物鏡的重要參數。

在選擇物鏡時需要考慮以下幾個問題：

1、需要多大的放大倍數？

● 物鏡可以根據其放大倍率分為三大類。其中包括：低倍物鏡(2x、4x/5x和10x)，中倍物鏡(20x、40x)和高倍物鏡(60x/63x、100x)。除了物鏡的放大倍率不同外，物鏡使用的介質也不同。例如，對于高倍鏡頭(60x和100x)，經常使用浸油來獲得高分辨率。放大倍率較低的鏡頭則采用空氣作為介質。

2、選擇哪種觀察方式？

● 顯微物鏡有很多類型，應用場景也各有不同，根據觀察方式的不同，也有不同種類。一般在物鏡的外殼上會標注物鏡的觀察方式。

● BF：明場；DF：暗場；PH：相差；PO：偏光；DIC：微分干涉；FL：熒光觀察(藍、綠、紫等)；UVFL：紫外熒光觀察。

3、如何選擇一個成像效果好的物鏡？

● ①要選擇有平場矯正功能的物鏡，即標有Plan。 ②主要根據色差校正的能力來判斷成像效果：消色差物鏡（Achromatic）：僅能校正紅藍光的色差。半復消色差物鏡（FL）：能校正紅綠藍三色光的色差。全復消色差物鏡（Apo）：能對紅綠藍三色光的色差校正兩次，同時能校正紅、藍兩色光的球差。

● 看透明切片可選擇平場消色差物鏡（Ach）。看熒光可選擇半復消色差物鏡（FL），而且有長工作距離可選，既可以看玻片也可以看培養(yǎng)皿。若需要更好的成像效果可選擇全復消色差物鏡（Apo），但Apo物鏡沒有長工作距離的，只適用于看玻片，不適合看培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等厚的樣品。

4、對分辨率的要求是什么？

● 顯微鏡的分辨率是能分辨兩點間的最小距離，能分辨的距離越小分辨率越高。數值孔徑（NA值）與分辨率成正比，NA = n * sin α。與放大率成正比，與景深成反比。同樣的放大倍數下，NA值越高越好。在工作距離都滿足的情況下選擇NA值高的物鏡。

5、需要多長的工作距離（WD）

● 根據工作距離的不同，可以分為：①普通工作距離物鏡：工作距離小，可以觀察切片，但不能觀察培養(yǎng)皿。②長工作距離物鏡：用于倒置顯微鏡，可以滿足組織、懸浮液等材料的鏡檢。

6、所使用的玻片或培養(yǎng)板的厚度是多少？

● 在標注物鏡的光學類型的后面（∞/0）(210/0)，也就是斜杠后面這個數字代表的是適用玻片厚度，（∞/0.17）(210/0.17)，適用玻片厚度就是0.17毫米。如果用了不合適的蓋玻片，則會出現很明顯的球差（不同角度的光線沒有會聚在同一高度）從而降低成像的對比度和分辨率。NA值越高的物鏡對蓋玻片厚度越敏感，所以要選擇正規(guī)的蓋玻片。有些高NA值的物鏡以及長工作距離的物鏡有可調的蓋玻片厚度調節(jié)環(huán)可以對不同厚度的玻璃進行矯正，可用于培養(yǎng)皿的觀察，觀察時調節(jié)到相應的培養(yǎng)皿的厚度，或使用共聚焦培養(yǎng)皿，中間厚度也為0.17。