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微流控電阻抗技術檢測蜜蜂孢子

瀏覽次數:5115 發布日期:2018-11-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
倘若地球上的蜜蜂消失了,人類或要消失?這句話不是小編說的,是下圖這個老頭兒說的。小編也絕沒有要危言聳聽的意思。
 

這個老頭兒在他的絕密手記上是這么說的:人類有可能在2060年滅絕;倘若地球上的蜜蜂全部消失了,人類或許也要消失了,甚至有可能只剩下不到4年的時間。


好吧,說什么我都不相信他說的2060年人類就滅絕的事情。不過認真地說,如果沒有蜜蜂授粉,地球上的萬物應該都會受到影響吧。難道要靠蒼蠅么?
 

內生孢子又稱芽孢,主要來源于寄生在昆蟲的消化道上皮細胞中的微孢子蟲,典型的有蜜蜂腸道微孢子蟲和家蠶微孢子蟲。微孢子蟲病感染傳播速度快,易出現群體體質衰弱甚至死亡,因此需要對昆蟲腸道中的內生孢子進行檢測,以達到對微孢子蟲病的防控和判斷最佳治療期。

目前,實驗室對于蜜蜂腸道內生孢子的計數只能通過顯微鏡計數,其過程費時費力,且蜜蜂腸道內生孢子粒徑較小,僅2~3μm,不同人員間鏡檢結果偏差較大,且濃度偏高時鏡檢尤其困難。卓微科技定制版JIMBIO CL 細胞計數儀可替代顯微鏡鏡檢,檢測濃度范圍為1e5~5e6,能夠提高計數效率,給出準確客觀的計數結果。


下面是整個蜜蜂腸道內生孢子的計數案例

材料:
感染微孢子蟲病蜜蜂 、PBS(1X)

孢子懸液純化制備:
1、取蜜蜂的腹部,置于放入蒸餾水及研磨粉的研缽中研磨。
2、研磨均勻后轉入10ml離心管中,500rpm低速離心3min。
3、上清轉入新的10ml離心管,棄沉淀,2000rpm高速離心10min。
4、棄上清,用清水重新懸浮沉淀,4000rpm離心10min。
5、取沉淀,用1mlPBS溶解沉淀,4℃保存備用。

顯微鏡鏡檢圖:
 




結果與分析:
 


從圖1、圖2可以看出,蜜蜂腸道內生孢子比較小,且濃度較高的時候,樣本平鋪在血球計數板上非常密集,顯微鏡下計數困難。

從表1中可以看出,定制版JIMBIO-CL測試結果與計數板統計相比,平均濃度基本一致,由于定制版JIMBIO-CL為10微升樣本全計數,測試結果波動較小,穩定性明顯優于進口血球計數板。

注意事項:
1、只能使用PBS(1X)稀釋待測蜜蜂孢子樣本;
2、加樣前需充分混勻待測樣本(可根據樣本總量選擇不同規格液槍吹打);
3、為保證檢測結果的穩定性,待檢測樣本總量不要低于100微升。

致謝:
感謝福建農林大學蜂學院郭睿老師課題組和黃偉峰老師課題組提供樣本,并共同完成應用開發。

歡迎研究蠶寶寶的課題組給我們致電,一起研究蠶寶寶的內生孢子。
 
發布者:江蘇卓微生物科技有限公司
聯系電話:400-993-9893
E-mail:yt.dong@jim-bio.com

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