測定細菌的大小實驗操作步驟

1．測微尺的構造 顯微鏡測微尺是由目鏡測微尺和鏡臺接物測微尺組成，目鏡測微尺是一塊圓形玻璃片，其中有精確的等分刻度，在5mm刻尺上分50份(圖14一lC)。目鏡測微尺每格實際代表的長度隨使用接目鏡和接物鏡的放大倍數而改變，因此在使用前必須用鏡臺測微尺進行標定。
鏡臺測微尺為一專用中央有精確等分線的載玻片(圖14—1A)，一般將長為1mm的直線等分成100個小格，每格長0.0lmm即10μm，是專用于校正目鏡測微尺每格長度的。

2．目鏡測微尺的標定 把目鏡的上透鏡旋開，將目鏡測微尺輕輕放在目鏡的隔板上，使有刻度的一面朝下。將鏡臺測微尺放在顯微鏡的載物臺上，使有刻度的一面朝上。先用低倍鏡觀察，調焦距，待看清鏡臺測微尺的刻度后，轉動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度相平行，并使兩尺左邊的一條線重合，向右尋找另外一條兩尺相重合的直線(圖15—lB)。

3．計算方法
標定公式：目鏡測微尺每格長度（μm）=兩條重合線間鏡臺測微尺的格數×10÷兩條重合線間目鏡測微尺的格數
例如，目鏡測微尺20個小格等于鏡臺測微尺3小格，已知鏡臺測微尺每格為10μm，則3小格的長度為3×10=30μm，那么相應地在目鏡測微尺上每小格長度為3×10÷20=1.5μm。用以上計算方法分別校正低倍鏡、高倍鏡及油鏡下目鏡測微尺每格實際長度。

4．菌體大小的測定 將鏡臺測微尺取下，分別換上大腸桿菌及金黃色葡萄球菌玻片標本，先在低倍鏡和高倍鏡下找到目的物，然后在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的大小。先量出菌體的長和寬占目鏡測微尺的格數，再以目鏡測微尺每格的長度計算出菌體的長和寬。并詳細記錄于表15—1中。
例如，目鏡測微尺在這架顯微鏡下，每格相當于1.5μm，測量的結果，若菌體的平均長度相當于目鏡測微尺的2格，則菌體長應為3×1.5μm=3.0μm。
一般測量菌體的大小，應測定10～20個菌體，求出平均值，才能代表該菌的大小。