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啟文生物雜交瘤技術平臺的優化策略

瀏覽次數:5765 發布日期:2018-9-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

雜交瘤技術仍然是單克隆抗體發現的主要技術,尤其是在治療性抗體藥物治療領域,相比噬菌體、酵母等非天然文庫,具有成藥性好、特異性強等特點。由于雜交瘤獲得的單克隆抗體,系經過哺乳動物細胞自然進化篩選獲得的序列,因此其通常不會遇到表達困難、產量低、非特異性結合等問題。

 

雜交瘤技術具有以下挑戰:
1. 對于免疫原性低的抗原,抗體滴度低、難以產生中和抗體;
2. 融合效率低、難以獲得低豐度存在的克隆;
3. 抗體親和力低、表位分布局限。

針對以上局限性,啟文生物提出了以下優化方案:


1. 針對低免疫原性抗原,免疫增強佐劑提高抗體效價

方法:我們的免疫增強佐劑在CFA等傳統佐劑的基礎上拓展T細胞的抗原表位識別,進而擴展抗體的表位

結果:多次試驗表明,初始免疫后,效價可提高5~10倍。

2. 針對融合時陽性率較低的現象,陽性克隆佐劑增強B細胞豐度

方法:在Pre-fusion boost階段,我們的陽性克隆佐劑可以增強陽性克隆在B細胞中的豐度,通過提高陽性率,從而幫助融合到稀有的克隆

結果:多次試驗表明,對于大多數抗原,改方法可以提高陽性率3~5倍。

3.專用培養體系提高融合效率

方法:我們提供經馴化的小鼠SP2/0細胞和雜交瘤細胞專用培養血清。對于結合先進的電融合技術來說,我們自產的電融合緩沖液的實驗效果和進口產品相當。

結果:根據客戶反饋,融合效率最高可達1 : 1000,通常可以做到1 : 4000以上。如果結合融合處理液一起使用,可以進一步提高融合效率(融合效率提升3~5倍)。

4.  雜交瘤細胞增強培養基提高克隆生長率

方法:在雜交瘤細胞電融合之后的克隆篩選和生長階段,我們提供雜交瘤細胞增強培養基。該培養基含有多種促進雜交瘤細胞生長的細胞因子。

結果:可以提高克隆生長率近10倍。

 

對于聚乙二醇法和電融合法來說,我們的大多數試劑都是通用的。具體種類如下表所示:

雜交瘤相關試劑

 

相關試劑圖片:

雜交瘤相關試劑

發布者:上海啟文生物科技有限公司
聯系電話:021-31300851
E-mail:info@qiwenbio.com

標簽: 雜交瘤專用
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