大多數(shù)藥物是通過結(jié)合一個或多個蛋白質(zhì)來影響其功能，這就產(chǎn)生了藥物開發(fā)中的兩個常規(guī)瓶頸：識別正確的靶蛋白，設(shè)計藥物能夠有效的尋找到并結(jié)合該蛋白。但是現(xiàn)在還沒有方法能夠有效且直接的測量藥物分子到達(dá)并結(jié)合靶蛋白的方法。卡羅林斯卡研究中心科學(xué)家開發(fā)出一種稱之為細(xì)胞熱轉(zhuǎn)移（CETSA，Cellular Thermal Shift Assay）的方法（Monitoring drug target engagement in cells and tissues using the cellular thermal shift assay, D Martinez Molina, R Jafari, M Ignatushchenko, T Seki, E.A Larsson, C Dan, L Sreekumar, Y Cao, P Nordlund, Science, 2013; 341:84-7.，）該方法采用的原理是靶蛋白在結(jié)合藥物分子后通常變得結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。

世界著名的腫瘤研究中心，安大略腫瘤研究所的科學(xué)家 Matias Casás-Selves，使用Wes 定量蛋白質(zhì)表達(dá)分析系統(tǒng)建立了細(xì)胞熱轉(zhuǎn)移實驗平臺。現(xiàn)分享其一研究數(shù)據(jù)：

Ø  細(xì)胞系： 粒細(xì)胞白血病細(xì)胞系MV4-11
Ø  藥物/化合物：該所專利化合物Compound1.無關(guān)化合物Compound2
Ø  研究靶蛋白：Protein X
Ø  實驗流程：
細(xì)胞系2.5X10^6MV4-11細(xì)胞，52℃（之前研究顯示52℃可以使Protein X變性沉淀）條件下，在0.00001-10um Compound1中孵育1小時，裂解細(xì)胞，提取蛋白，使用Wes定量檢測Protein X水平。
Ø  實驗結(jié)果預(yù)期：
如果Compound 1可以結(jié)合Protein X，則Protein X穩(wěn)定，在52℃下不會變性，可以檢測到其表達(dá)量，且表達(dá)量和Compound 1量呈劑量依賴關(guān)系。
Ø  CETSA-Wes監(jiān)測結(jié)果：

隨Compound劑量升高，Protein X可監(jiān)測到的表達(dá)量升高，呈劑量依賴關(guān)系，并可據(jù)此計算IC50。

作為對照Compound2不結(jié)合Protein X，無保護(hù)作用，故Protein X變性沉淀，表達(dá)水平與Compound2無劑量依賴關(guān)系。

CETSA-Wes是一種創(chuàng)新的技術(shù)，可以定量檢測細(xì)胞內(nèi)藥物和其作用靶蛋白結(jié)合能力，將有助推動藥物研發(fā)及藥物作用機理研究。

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