摘要：西妥昔單抗（愛必妥Cetuximab/Erbitux）是第一個靶向EGFR的抗腫瘤單抗藥物，它與新一代熒光探針——量子點的偶聯物，可用于EGFR高表達的腫瘤細胞的體外及在體成像。

表皮生長因子受體（Epidermal growth factor receptor, EGFR）是腫瘤標志物，在很多類型腫瘤如乳腺癌、肺癌、前列腺癌以及直腸癌等都有高表達，是重要的預后指標。西妥昔單抗（愛必妥Cetuximab/Erbitux）是第一個靶向EGFR的抗腫瘤單抗藥物。與傳統有機熒光染料比較，量子點具有熒光亮度高、熒光穩定性強等優異的光化學特性，是新一代的熒光標記探針。以量子點標記EGFR抗體，可用于EGFR高表達的腫瘤細胞的體外及在體成像研究。

韓國Rita Song課題組應用三種不同的偶聯策略，以獲得具有生物學功能的量子點-愛必妥偶聯物，并用于腫瘤特異性成像。其中應用PEG包被的量子點以及兩個長鏈雙異官能團的接頭sulfo-LC-SPDP與sulfo-SMCC，成功將量子點與愛必妥進行了偶聯（圖1）。該偶聯物與EGFR的解離常數是0.61±0.28nM；利用紫外-可見光譜儀、熒光分光光度計、瓊脂糖凝膠電泳、BCA蛋白濃度測定以及動態光散射等方法對偶聯物進行了表征；利用激光共聚焦顯微鏡觀察到該偶聯物與活細胞結合、并與轉鐵蛋白共定位分布（圖2）。上述實驗結果為高表達EGFR的腫瘤細胞成像提供了新的研究手段，可為相關藥物治療及預后分析提供重要信息。

圖1 瓊脂糖凝膠電泳（A）和動態光散射（B）確認量子點與愛必妥的偶聯

A圖中上圖為量子點QD605的熒光成像，下圖為相應電泳后的考馬斯亮藍染色。

各泳道樣品分別為：1. 量子點QD605（對照）；2. 由sulfo-LC-SPDP活化的量子點；3. 量子點-愛必妥偶聯物（由LC-SPDP及SMCC接頭偶聯）；4. 量子點-愛必妥偶聯物（由EDC偶聯）；5. 愛必妥（EGFR抗體）；6. 由sulfo-SMCC活化的愛必妥。電泳條件：1%瓊脂糖凝膠/0.5xTBE緩沖液（pH8.5），50Vcm^-1,40min。

圖2 量子點-愛必妥偶聯物的體外細胞成像

左：體外培養A549細胞的明場成像；中：量子點-愛必妥偶聯物與A549細胞孵育20min；右：量子點-愛必妥偶聯物與A549細胞孵育1h。

文獻來源：

Lee J, Choi Y, Kim K, Hong S, Park HY, Lee T, Cheon GJ, Song R. Characterization and cancer cell specific binding properties of anti-EGFR antibody conjugated quantum dots. Bioconjug Chem. 2010;21(5):940-6.