概況

高通量單細胞測序技術對樣本的要求很高，需要將樣本制備成高質量的單細胞懸液才能進行后續實驗。但實體組織多種多樣，根據不同實體組織成分的特點可以選擇不同的分散細胞的方法。常用的制備單細胞混懸液有酶解法，機械法和化學處理法。在處理不同組織時，需要摸索合適方法，盡可能采用對細胞損傷小，產率較高的制備方法，最大限度地保持細胞原有特性。

酶解法利用特定酶進行相應的化學反應除掉一些特定結構，尤其適合將小塊組織消化成為單個細胞，常規消化需要在一定的時間和溫度下進行振蕩操作，樣品量一般在 1 ~ 2 ml 左右。

測試條件

樣品 水
儀器 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒溫混勻儀
混勻 關閉
溫度 37 °C
樣品量 1.8 ml * 24

實驗步驟

1. 使用水作為測試樣品，來驗證儀器的控溫效果。

2. 在 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒溫混勻儀中加入 1.8 ml 水，設定 37 ℃，選擇 Fast 控溫模式。

3. 使用第三方溫度探頭測試水的溫度穩定性和均一性。

結果

> 溫度均一性為 6 個點的最大溫度偏差
> 溫度準確性為 6 個點與設定值的最大偏差
> 該測試未開啟混勻功能

結論

1. 不同的酶消化反應，對溫度以及消化時間要求不同, 合適的消化酶以及設備能大大加快細胞解離速率，也有利于獲得更高的細胞產量。酶解法在細胞分離中適用范圍廣，是分離方法的推薦選折。

2. IKA 恒溫混勻儀 MATRIX Orbital Delta 系列可用于酶解法中的消化反應。高通量、精確控溫、定時，可調混勻速度保證高質量單細胞混懸液的制備。


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