利用ABT的Nickel NTA瓊脂糖[6BCL-NTANi]進(jìn)行重組蛋白純化
“開發(fā)一種針對TIM-3受體具有更高親和結(jié)合力的CEACAM1變體，可能對免疫療法產(chǎn)生積極的影響”
TIM-3是一種可以在多種細(xì)胞中表達(dá)的抑制性受體，包括樹突狀細(xì)胞、T-helper 1淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞。
這種蛋白與其配體CEACAM1結(jié)合會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞衰竭，即效應(yīng)T細(xì)胞失去增殖和產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力。阻斷這種抑制性受體被認(rèn)為是治療癌癥和相關(guān)疾病的有效策略。在這項(xiàng)研究中，通過蛋白質(zhì)工程開發(fā)并生產(chǎn)了一種與 TIM-3 結(jié)合親和力更強(qiáng)的重組蛋白，以阻斷抑制性 TIM-3 受體。
已有證據(jù)表明，CEACAM1的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域足以與TIM-3結(jié)合。通過在CEACAM1的IgV結(jié)構(gòu)域的這些位置引入突變，目的是通過選擇能夠形成氫鍵或離子鍵的氨基酸來增加與 TIM-3 的結(jié)合親和力。突變體 39 被確定為最合適的CEACAM1變體。
在本研究中使用了ABT的Nickel NTA瓊脂糖[6BCL-NTANi]進(jìn)行重組蛋白純化。在這個(gè)過程中，瓊脂糖與鎳離子結(jié)合，鎳離子對目標(biāo)蛋白的組氨酸殘基具有高親和力。
通過使用ABT這一產(chǎn)品，可以分離或固相CEACAM-1變體39重組蛋白，獲得一個(gè)純化且均質(zhì)的樣本。
研究得出結(jié)論，開發(fā)具有更高TIM-3受體結(jié)合親和力的CEACAM1變體可能對免疫療法和與免疫抑制相關(guān)的疾病治療具有積極的意義。
這突出了純化蛋白以調(diào)節(jié)特定免疫反應(yīng)的潛力，為開發(fā)更有效的癌癥和其他免疫相關(guān)疾病療法開辟了新的途徑。
1. Hajihassan et al., Engineering a CEACAM1 Variant with the Increased Binding Affinity to TIM-3 Receptor, Iranian Biomedical Journal (2023).
TIM-3是一種可以在多種細(xì)胞中表達(dá)的抑制性受體，包括樹突狀細(xì)胞、T-helper 1淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞。
這種蛋白與其配體CEACAM1結(jié)合會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞衰竭，即效應(yīng)T細(xì)胞失去增殖和產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力。阻斷這種抑制性受體被認(rèn)為是治療癌癥和相關(guān)疾病的有效策略。在這項(xiàng)研究中，通過蛋白質(zhì)工程開發(fā)并生產(chǎn)了一種與 TIM-3 結(jié)合親和力更強(qiáng)的重組蛋白，以阻斷抑制性 TIM-3 受體。
已有證據(jù)表明，CEACAM1的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域足以與TIM-3結(jié)合。通過在CEACAM1的IgV結(jié)構(gòu)域的這些位置引入突變，目的是通過選擇能夠形成氫鍵或離子鍵的氨基酸來增加與 TIM-3 的結(jié)合親和力。突變體 39 被確定為最合適的CEACAM1變體。
圖1：使用12% SDS凝膠電泳進(jìn)行蛋白質(zhì)分析。
M，分子量Marker；第1和第2道，分別是從Shuffle T7菌株中提取的蛋白質(zhì)，在Ni+2-NTA填料純化前后。
M，分子量Marker；第1和第2道，分別是從Shuffle T7菌株中提取的蛋白質(zhì)，在Ni+2-NTA填料純化前后。
在本研究中使用了ABT的Nickel NTA瓊脂糖[6BCL-NTANi]進(jìn)行重組蛋白純化。在這個(gè)過程中，瓊脂糖與鎳離子結(jié)合，鎳離子對目標(biāo)蛋白的組氨酸殘基具有高親和力。
通過使用ABT這一產(chǎn)品，可以分離或固相CEACAM-1變體39重組蛋白，獲得一個(gè)純化且均質(zhì)的樣本。
研究得出結(jié)論，開發(fā)具有更高TIM-3受體結(jié)合親和力的CEACAM1變體可能對免疫療法和與免疫抑制相關(guān)的疾病治療具有積極的意義。
這突出了純化蛋白以調(diào)節(jié)特定免疫反應(yīng)的潛力，為開發(fā)更有效的癌癥和其他免疫相關(guān)疾病療法開辟了新的途徑。
1. Hajihassan et al., Engineering a CEACAM1 Variant with the Increased Binding Affinity to TIM-3 Receptor, Iranian Biomedical Journal (2023).
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