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細胞培養(yǎng)“板瓶皿”在細胞培養(yǎng)過程中的應(yīng)用及注意事項

瀏覽次數(shù):1829 發(fā)布日期:2024-1-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

培養(yǎng)細胞時,何時使用培養(yǎng)瓶,何時使用孔板培養(yǎng),取決于實驗?zāi)康暮托枰?strong>一般情況下,原代細胞培養(yǎng)和常規(guī)傳代培養(yǎng)使用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實驗用細胞。
 

細胞培養(yǎng)瓶 


由高品質(zhì)聚苯乙烯(PS)材料,以超精密模具及全自動化生產(chǎn)工藝生產(chǎn),產(chǎn)品應(yīng)用于實驗室細胞培養(yǎng),優(yōu)異的光學性質(zhì)便于顯微觀察,表面經(jīng)過TC處理,細胞貼壁效果更佳。                           


TIPS:什么是TC處理?


TC處理表示該器皿經(jīng)過表面的改性處理,適合貼壁細胞的培養(yǎng)。而懸浮生長的細胞,就不一定需要這樣經(jīng)過特殊處理過的器皿。但經(jīng)過表面的改性處理后的細胞培養(yǎng)皿等一般也適合懸浮細胞的培養(yǎng)。

大部分動物細胞需要貼附在一個固相界面上才能生長。而只有親水的固相界面,細胞才能貼附。

最早的細胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的,不經(jīng)過特殊的處理,普通的細胞就可以貼附生長。而聚苯乙烯透光性能好,具有較好的強度和易塑性,并且沒有毒性,成為一次性細胞培養(yǎng)皿和細胞培養(yǎng)板等一次性細胞培養(yǎng)耗材的首選材料,然而聚苯乙烯表面是疏水的,所以需要經(jīng)過表面的改性處理,增強細胞吸附與蛋白結(jié)合的能力,變成親水后才能適用于細胞培養(yǎng)。                                              

1 、如何選擇培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞

首先,根據(jù)期望獲得的細胞產(chǎn)量來選擇,培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數(shù)字就是表面積,25就是25平方厘米,如此類推;

其次,根據(jù)實驗操作熟練程度來選擇,不管是換液、傳代、還是收獲細胞,培養(yǎng)皿的操作比較方便,但因為其開口很大,所以容易污染,如果你是新手,不建議直接用培養(yǎng)皿養(yǎng)細胞。

細胞培養(yǎng)皿


最后,如果選擇培養(yǎng)瓶培養(yǎng),還應(yīng)該盡量選擇有斜肩設(shè)計、帶透氣孔瓶蓋的型號。

前者可以避免培養(yǎng)瓶平放后,過多的培養(yǎng)基接觸瓶蓋造成污染,后者可以保持內(nèi)外的二氧化碳濃度一致。

如果瓶蓋不透氣,那在放進培養(yǎng)箱時,應(yīng)擰松一圈,以便內(nèi)外氣體能順利交換。


2 、以細胞為載體或?qū)ο蟮膶嶒炇褂眉毎囵B(yǎng)板較好,如藥敏試驗、MTT(96孔培養(yǎng)板)、免疫組化(6孔培養(yǎng)板)等。
 

細胞培養(yǎng)板 


選擇好合適的孔板后,在培養(yǎng)階段,有2點注意事項:

  • 多孔板會帶板蓋,但其密封性不好,在培養(yǎng)箱內(nèi)會造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高,進而影響細胞生長速率?梢栽谏w上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位,并采用添加培養(yǎng)基來代替。


    NEST EDGE細胞培養(yǎng)板

    EDGE細胞培養(yǎng)板周圍具有溝槽設(shè)計,通過改變原有96孔板的結(jié)構(gòu),在最外側(cè)孔的外側(cè)設(shè)計了不同寬度及厚度的槽形結(jié)構(gòu),因此達到最大程度消除邊緣效應(yīng)的目的,同時又保證了細胞培養(yǎng)的最佳狀態(tài)。提高了培養(yǎng)板的溫度穩(wěn)定性和均衡的濕度環(huán)境,從而減 少或消除了邊緣效應(yīng),保證了細胞生長的均一性。
     


     

  • 當細胞種入孔內(nèi)以后,不應(yīng)該再進行過多的震動,例如晃動、抖動培養(yǎng)板,而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。
     

  • 如果培養(yǎng)箱由多人共用,還應(yīng)該考慮頻繁開關(guān)箱門、拿放孔板造成的震動,這些不利因素都應(yīng)該盡量減少。

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