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花青素(Anthocyan)檢測試劑盒(微板法)使用說明書

瀏覽次數:2116 發布日期:2023-6-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
花青素(Anthocyan)檢測試劑盒(微板法)
 
花青素(anthocyan,cyanidin)又稱花色素(anthocyanidin),屬黃烷衍生物,溶解于細胞液中,是植物體內廣泛分布的花色素之一,是花色素苷(anthocyains, anthocyanin)  水解而得的有顏色的苷元,植物體內存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質與花、果實和葉片的顏色有關,而且與果實等樣品衰老過程密切相關,對其加工性能、存儲、營養價值等都有重要影響。
 
植物花青素檢測試劑盒(微板法)檢測原理是花青素溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提花青素,花青素在酸性溶液中呈紅色,顏色深淺與花青素含量呈正比,于 530nm 有最大吸收波,可利用酶標儀測定其吸光度,進而計算出花青素的含量,方法簡單易行。因組織中花青素種類不同,所需標準品亦不同,該試劑盒不含標準品,因此只能檢測花青素的相對含量;如需檢測樣品中花青素的準確含量,請自備對應種類的花青素標準品,主要用于植物組織或果實中花青素的提取以及定量檢測花青素相對含量。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
 
產品組成:

TP1101
100T
Storage
Anthocyan Assay Buffer 2×500ml RT
使用說明書 1 份
 
自備材料:
1、實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織
2、研缽或勻漿器
3、離心管、離心機
4、濾紙或紗布
5、96 孔板
6、酶標儀
 
操作步驟(僅供參考)
1、花青素提取:
方法一:
①4℃預冷研缽或勻漿器,以及 Anthocyan Assay Buffer。
②取植物組織,洗凈,擦干,稱取新鮮樣品   0.25g,剪碎,置于研缽或勻漿器中。
③加入 2~3ml Anthocyan Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉入 10ml 離心管,用 Anthocyan Assay Buffer 沖洗研缽或勻漿器并轉移至離心,補加 Anthocyan Assay Buffer 至 8ml。
④4℃避光靜置20min,期間搖動2~3 次,然后過濾至離心管,也可用離心機8000r/min離心 3min,濾液(上清液)即為花青素粗提液。
方法二:
將樣品按上述比例加入提取液中,置于 32℃溫箱浸提 4~8h(期間可搖動數次)或室溫下避光浸提 24h,離心取上清即為花青素粗提液。

2、加樣及測定:取 96 孔板,用 Anthocyan Assay Buffer 做空白對照,取花青素提取液
(200~300ul)用酶標儀在 530nm 波長處讀取吸光度值;如果花青素濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置 2 平行孔,求平均值。
 
計算:
花青素單位定義:以 OD 值為 0.1 時的花青素濃度稱為一個單位(U);計算方法如下:組織樣品的花青素含量(U/g)=(A測定-A空白)/(0.1xW)
式中:A測定=花青素提取液在 530nm 的 OD 值 A空白=空白對照在 530nm 的 OD 值 W=樣品鮮重(g)
亦可用自備的花青素標準品做梯度稀釋(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml),用  Anthocyan  Assay  Buffer 做空白對照,繪制標準曲線,進而計算出樣品中花青素的含量。
組織樣品的花青素(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中:C=根據標準曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml) VT=花青素粗提液總體積(ml)=8
V1=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml) W=樣品鮮重(g)
液體樣品的花青素(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據標準曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml) V=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)
N=稀釋倍數
 
注意事項:
1、為了避免花青素見光發生變化,操作時應盡量避光,研磨或勻漿應盡量縮短時間。

2、取樣量、試劑用量應根據花青素含量適當調整。
3、Anthocyan Assay Buffer 應密閉保存,避免有效成分揮發。 4、 如果沒有酶標儀,也可以使用分光光度計測定。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
有效期:12 個月有效。
發布者:上海雅吉生物科技有限公司
聯系電話:021-34661276
E-mail:58268971@qq.com

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