本期小編將為大家?guī)��?lái)2023年第一季度EV領(lǐng)域的3篇高檔次文章。這三篇文章內(nèi)容聚焦于EV靶向藥物遞送的疾病治療，包含腫瘤來(lái)源微囊泡載藥在肺腺癌治療中的應(yīng)用、干細(xì)胞來(lái)源sEV靶向修飾對(duì)骨缺損修復(fù)，以及新的蛋白類藥物遞送平臺(tái)：TOP-EV。值得一提的是，三篇文章均利用納米流式檢測(cè)技術(shù)(nano-flow cytometry, NanoFCM)在單顆粒水平對(duì)EVs的粒徑和濃度等物理性質(zhì)、標(biāo)志蛋白和靶向單元等生化指標(biāo)進(jìn)行了表征。

一、腫瘤來(lái)源微囊泡載藥在肺腺癌治療中的應(yīng)用

關(guān)鍵詞
肺腺癌，腫瘤源性微囊泡，單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體4(MCT4)，氟伐他汀，腫瘤微環(huán)境

研究摘要
單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體4(MCT4)在乳酸的外排中發(fā)揮著重要作用，而其過表達(dá)卻與多種癌癥的不良預(yù)后有關(guān)。氟伐他汀(Fluvastatin)作為一種脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)劑，已被作為靶向MCT4的治療肺腺癌(LUAD)的抑制劑。在此，作者利用腫瘤細(xì)胞來(lái)源的微囊泡(TMPs)低毒性、良好的生物相容性以及腫瘤靶向性等優(yōu)勢(shì)，將其作為一種高效的藥物傳遞系統(tǒng)，用于運(yùn)輸氟伐他汀。結(jié)果表明裝載了氟伐他汀的微囊泡(TMP-F)可通過抑制MCT4的表達(dá)來(lái)抑制乳酸外排，從而減弱LUAD的發(fā)展進(jìn)程。TMP-F可在增加腫瘤微環(huán)境中NK和CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn)，并使巨噬細(xì)胞由M2型極化為M1型，同時(shí)減少調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)和髓系來(lái)源的抑制細(xì)胞(MDSC)的含量，以達(dá)到降低腫瘤微環(huán)境(TME)的免疫抑制。此外，TMP-F和化療藥物順鉑的聯(lián)合使用時(shí)，可提高順鉑的抗腫瘤效率，并抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。總的來(lái)說，TMP-F或TMP-F與順鉑聯(lián)合治療是一種提高LUAD治療效果非常有前景的策略。
 

圖1. 研究技術(shù)路徑

更多載藥策略可參見往期文章
外泌體載藥策略：你選對(duì)了嗎？
JEV：牛奶外泌體載藥新突破

二、靶向肽修飾干細(xì)胞來(lái)源小細(xì)胞外囊泡對(duì)骨缺損修復(fù)的研究

關(guān)鍵詞
干細(xì)胞來(lái)源小細(xì)胞外囊泡、靶向纖維蛋白、CREKA 、骨修復(fù)

研究摘要
骨修復(fù)過程受到大量生物活性因子的高度調(diào)控。研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞衍生的小細(xì)胞外囊泡(MSC-sEVs)在組織修復(fù)中具有巨大的潛力。然而，sEVs的較低的歸巢能力和駐留能力，一定程度上限制了其進(jìn)一步的臨床應(yīng)用。在本研究中，通過疏水插入法將纖維蛋白靶向肽CREKA修飾到sEVs表面，利用纖維蛋白在受傷組織大量表達(dá)這一特性，使構(gòu)建的CREKA-sEVs獲得向組織缺損部位富集的能力。結(jié)果表明，這種表面修飾方法簡(jiǎn)單有效且不會(huì)影響sEVs固有的生物活性。雖然，sEVs和CREKA-sEVs在體外均表現(xiàn)出促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)成骨分化、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)血管生成和調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞表型等生物學(xué)功能；但是，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明CREKA 修飾顯著提高了sEVs在骨缺損部位的富集和停駐，并能通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和促進(jìn)細(xì)胞成骨分化來(lái)促進(jìn)骨組織的修復(fù)。綜上，該研究表明CREKA-sEVs在骨組織修復(fù)中具有很大的應(yīng)用價(jià)值，為提高sEVs的治療效率提供了一種新的策略。

干細(xì)胞外泌體研究熱度持續(xù)高走，參見往期文章
干細(xì)胞外泌體：未來(lái)已來(lái)，你來(lái)不來(lái)

三、TOP-EVs：一種高效的胞內(nèi)蛋白遞送平臺(tái)

關(guān)鍵詞
細(xì)胞外囊泡(EVs)，活性蛋白負(fù)載，功能性胞內(nèi)蛋白遞送，基因編輯，TOP-EV

研究摘要
EV在作為藥物遞送載體的限制因素之一在于如何實(shí)現(xiàn)EV中靶蛋白的高效裝載以及到達(dá)受體細(xì)胞后靶蛋白的有效釋放。在這里，作者發(fā)展了一種TOP-EV技術(shù)，用于高效介導(dǎo)靶向蛋白在胞內(nèi)的遞送。通過在供體細(xì)胞中整合水皰性口炎病毒糖蛋白(VSV-G)和雷帕霉素誘導(dǎo)的FKBP12/T82L突變體FRB蛋白的異二聚化來(lái)促進(jìn)EV對(duì)蛋白質(zhì)的裝載。利用該平臺(tái)在體外有效提高了EVs對(duì)于Cre重組酶和CRISPR/Cas9核酸酶復(fù)合物的遞送。此外，研究還發(fā)現(xiàn)TOP-EVs可以在肝臟中成功介導(dǎo)細(xì)胞間的蛋白遞送。綜上所述，TOP-EV提供了一個(gè)多功能遞送平臺(tái)，可在體內(nèi)體外條件下高效進(jìn)行胞內(nèi)蛋白的遞送，可用于促進(jìn)蛋白類治療藥物的發(fā)展。
 

圖2. TOP-EV構(gòu)建流程

高效遞送平臺(tái)構(gòu)建的前提是擁有高純的外泌體，更多純化策略，參見往期文章
最新突破：如何從體液中獲得真正的細(xì)胞外囊泡
外泌體純不純，一聞就知
 

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