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患者衍生類器官PDO+Matrigel分液解決方案

瀏覽次數:4304 發布日期:2021-5-13  來源:騰泉生物
01精準醫學和個性化醫療的新寵:PDO
PDO(Patient-Derived Organoid), 即患者衍生的類組織器官,是有望提高新藥研發效率和提高腫瘤治療效果的新工具,不同于CDX (基于細胞系的異種移植腫瘤)和PDX(基于病人的異種移植腫瘤),是個性化治療和精準醫學的新寵兒。
 
目前PDO在技術應用上存在一些問題亟待解決,如培養技術仍不夠成熟;有些癌癥模型無法使用PDO進行建模;建模的效率不高等等。其中,各種腫瘤類器官細胞培養混合物由于成分復雜且粘稠,通常是手動操作,難以實現自動化,從而制約了其用于高通量和大規模應用。
手機屏幕截圖低可信度描述已自動生成
Organoids登上了2019年《科學》雜質的封面
 
02、SPT Labtech& Corning 康寧共同開發基于PDO+Matrigel混合物分液的解決方案
dragonfly discovery是SPT Labtech 研發的多功能分液工作站,目前主要用于藥物研發中的方法學開發(assay development)、高通量篩選(HTS) 以及酶和細胞學實驗(enzyme based cell assay)。
DFD有以下獨特的優勢:
1. 超大的量程(200 nL- 4 mL)
2. 超低的死體積(<50 uL)
3. 超高的精度(12.5 nL )
4. 超快的速度(26秒完成384孔板分液)
5. 無視液體粘度(70%甘油,吐溫,75%乙醇,各種Matrigel膠和基質膠)
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dragonfly discovery® from SPT Labtech
 
Matrigel®是Corning公司分離自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物,主要適用于3D細胞的培養。Matrigel對溫度非常敏感,超過10℃就會開始成膠,變得粘稠,因此需要在溶解后快速處理。
牙刷在桌子上中度可信度描述已自動生成
最近,SPT Labtech和Corning公司合作,共同開發類器官和Matrige膠的混合分液,通過dragonfly discovery成功將低至3 uL的人源腸類器官和Corning Matrigel混合物分配至96孔板,用于后續的forskolin-induced swelling (FIS) assay。

配備冷凍模塊,10 min內保持matrigel在8℃以下
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即便是粘稠的Matrigel和組織混合物也能完成分液

每一個液滴都能準確加入孔板正中央
 
03、實驗結果
Figure.1 Uniform domes dispensed in the center of each well. Representative image of uniform, single domes dispensed in each well of a 96-well microplate with one well digitally zoomed in. Images were taken with High-Content Screening Platform using a 2X objective.
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Fig.1 96孔中,2倍鏡下的organoid dome
 
Figure 2. Consistency of dispense within a plate. The number of organoids dispensed in each dome from three 96-well microplates was enumerated in order to calculate consistency across each plate. Each plate resulted in a CV of less than 18%
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Fig.2 每個孔內organoid的數量是均一的
 
Figure 3. Representative images before and after forskolin addition. Representative photomicrographs demonstrating healthy and CF organoid swelling response under different conditions. Images were taken by High-Content Screening Platform using a 2X objective
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Fig.3 Forskolin刺激后,在不同條件下的Organoid的反應
04結論
PDO雖然有廣泛的應用前景,如體外藥敏檢測等,但由于其培養基是天然提取物,價格很高,培養所涉及的多種細胞因子價格也不菲,因此降低成本,提高自動化程度和通量是進一步發展類器官平臺的重要方向之一。目前,SPT Labtech成功將Corning Matrigel和類器官混合物在微縮化體系(3 uL/96孔,200 nL/384孔)中添加,正是朝著低成本化邁出重要的一步,更多的應用正在開發中,敬請期待。
圖片
3uL in 96孔板, 200 nL in 384孔板
完整視頻:
發布者:SPT Labtech
聯系電話:400-151-8616
E-mail:marketing@sptlabtech.cn

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