天天干亚洲_99久久免费国_亚洲国产精品成人久久久软件_亚洲成av人**亚洲成av**_精品中文字幕在线AⅤ_男女真实毛片视频图片

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 新型冠狀病毒Mpro/3CLpro抑制劑篩選試劑盒(增強型)使用說明

新型冠狀病毒Mpro/3CLpro抑制劑篩選試劑盒(增強型)使用說明

瀏覽次數:2175 發布日期:2020-12-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

1.樣品的準備。
取適量待測定的抑制劑樣品,用Assay Buffer或DMSO等適當的溶劑配制成適宜濃度的溶液,如果有必要可配制成適當的濃度梯度待用。


2.陽性對照的準備。
本試劑盒提供的陽性對照抑制劑Ebselen濃度為10mM,配制在DMSO中,可以根據需要使用與待測抑制劑一樣的溶劑稀釋成所需濃度或濃度梯度。通常Ebselen的IC50約為0.5μM-2μM,使用本試劑盒時Ebselen的抑制效果參考圖2。


3.樣品測定。
a.根據樣品數量(含相關對照),參考下表配制適量的Assay Reagent。注:由于2019-nCoV Mpro/3CLpro的甘油含量較高,微量吸取時要注意避免吸頭吸附損失并吹打完全,加入2019-nCoV Mpro/3CLpro后需要注意充分混勻。

1個樣品 5個樣品 10個樣品 20個樣品
Assay Buffer 92μl 460μl 920μl 1.84ml
2019-nCoV Mpro/3CLpro 1μl 5μl 10μl 20μl


a.參考下表,使用96孔黑板設置各組別,并按照下表依次加入檢測試劑和樣品。加入待測樣品后,混勻。為獲得更加可靠的檢測結果,建議每個樣品至少應該進行2個重復孔的檢測。

  空白對照 100%酶活性對照 陽性抑制劑對照 樣品
Assay Buffer 93μl - - -
Assay Reagent - 93μl 93μl 93μl
Ebselen溶液 - - 5μl -
樣品溶劑 5μl 5μl - -
待測樣品 - - - 5μl


注:樣品溶劑是指配制和稀釋待測抑制劑所用的溶劑。
b.各孔快速加入Substrate 2μl,混勻。注:加入Substrate后反應會立即開始,如果孔數較多的情況下,建議在低溫或使用排槍操作以減小各孔間加入Substrate的時間差而導致的誤差,混勻操作可在培養板振蕩器上進行。
c.37℃避光孵育5分鐘后信號即趨于穩定,可在5-20分鐘內使用多功能酶標進行熒光測定。激發波長為340nm,發射波長為490nm。當熒光讀數偏低時,也可適當延長孵育時間至20-30分鐘。
注:也可在步驟a中將待測樣品加入后37℃孵育10分鐘,再將Substrate加入反應體系中。37℃孵育10分鐘再加入Substrate可能會降低抑制劑的IC50。建議通過預實驗確定未知抑制劑比較適合的孵育時間。

4.計算:
a.計算每個樣品孔和空白對照孔的平均熒光值,可分別記錄為RFU空白對照、RFU100%酶活性對照、RFU陽性對照和RFU樣品。RFU,Relative Fluorescence Unit。
b.計算每個樣品的抑制百分率。計算公式如下:
抑制率(%) = (RFU100%酶活性對照 - RFU樣品) / (RFU100%酶活性對照 - RFU空白對照) × 100%
c.對于檢測發現有效的抑制劑,通過檢測該抑制劑的劑量效應就可以計算出該抑制劑的IC50。使用本試劑盒檢測Ebselen對于2019-nCoV Mpro/3CLpro的抑制作用的檢測結果參考圖2,Substrate直接加入反應體系中,然后孵育5分鐘進行熒光測定,IC50約為0.62μM。

圖2. 新型冠狀病毒(2019-nCoV) Mpro/3CLpro抑制劑篩選試劑盒(增強型)檢測Ebselen的效果圖。實際檢測結果可能會因樣品和檢測條件等的不同而存在差異,圖中數據僅供參考。

發布者:上海雅吉生物科技有限公司
聯系電話:021-34661276
E-mail:58268971@qq.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 色婷婷五月另类综合视频在线 | 性欧美18—19sex性高清 | 亚洲一级特黄 | 一区二区三区日本在线观看 | 在线观看国精产品一区 | 中文无码一区二区视频在线播放 | 国产精品久久久久久久泡妞 | 日韩国产免费一区二区三区 | 免费黄色在线观看视频 | 久久国产一二三 | 国产一国产二国三视频在线看 | www.久久爱69.com | 亚洲精品免费看 | 一本一道久久综合久久 | 亚洲综合网站 | 亚洲国产精品成人综合久久久久久久 | 国产一区二区三区四区区 | 亚洲一区中文字幕在线观看 | 亚洲精品国产精品乱码不卞 | 亚洲视频免费观看 | 国产一级v片不卡在线 | 日韩精选在线 | 免费人成免费观看视频 | 国产做a爱一级久久 | 韩国一级无码免费精品视频 | 一区二区三区国产在线 | 自拍偷区亚洲国内自拍蜜臀 | 国产一区二区三区四区五区传媒 | 一级片视频免费在线观看 | 日韩亚洲欧美中文字幕 | 国产高清黄色在线观看 | 色姑娘久 | 免费一级毛片免费播放 | 50丰满少妇高潮惨叫正在播放 | 日韩人妻无码一区二区三区综合 | 风韵丰满熟妇啪啪区老熟熟女 | 久在线看 | 国产精品免费一区二区久久夜色 | 国产成年无码AⅤ片在线观看 | 超粉嫩00无码福利视频 | 国产在线精品一区二区中文 |