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STELLARIS的熒光壽命成像應用

瀏覽次數:2290 發布日期:2020-6-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
上一期介紹了Leica的科學家們利用新一代Power HyD S檢測器與二代白激光,掙脫金字塔的束縛。然而,僅在這四個頂點上的不斷探索,似乎并不能完全復刻真實。于是科學家們提出了一個新的方向——功能成像。
為了實現功能成像,我們在之前的成像基礎上引入一個嶄新的維度——熒光壽命成像。
以往,提到熒光壽命成像,對于生物學家來說可謂是愛悠悠恨悠悠,愛它能提供更多維度信息,恨他操作困難。不僅需要采購一整套FLIM相關設備,還要系統學習FLIM的理論知識和專業FLIM軟件模塊的算法。
經過多年的不斷迭代,2018年,Leica推出了高度集成的高速熒光壽命成像FALCON(FAst Lifetime CONtrast)(產品鏈接https://www.leica-microsystems.com/products/confocal-microscopes/p/stellaris-8-falcon/)。為了將功能成像帶給更多的用戶,我們在STELLARIS平臺搭載了基于熒光壽命的TauSense模塊,使得您更易獲得熒光分子的熒光壽命相關信息。畢竟,無論實驗樣品的制備流程如何,熒光壽命的信息一直存在。結合熒光光譜強度信息,可以同步獲得更精準的結構信息和功能信息。
首選,我們來看一下TauSense給大家帶來怎樣的熒光壽命信息。
(圖一)中可以看到,熒光分子的光譜信息和熒光壽命是相互獨立的。這就意味著,即使熒光光譜相似,熒光分子也有可能不一樣。因此可以通過熒光壽命的不同來區分熒光光譜相近的熒光分子。
基于此特性,就有可能將原本熒光光譜疊加的熒光分子區分開來(圖二)。原本通過光譜特性區分出的兩通道熒光信息,借助熒光壽命的差異,就進一步拆分出了四個獨立通道。
圖二 利用熒光壽命拆分熒光通道
除此之外,由于熒光壽命并不會受熒光強度和光淬滅的影響,因此利用熒光壽命來進行長時間的功能成像結果更準確。比如進行鈣震蕩成像時,主要觀察鈣離子濃度升高和降低的趨勢,從圖三可以看出恢復靜息狀態之后,鈣離子的熒光壽命與剛開始比較,幾乎沒有變化。想了解更多TauSense的應用,請下載相關文章(下載鏈接)
介紹了這么多STELLARIS新硬件的性能,您是不是有點好奇STELLARIS在軟件方面還有哪些新功能呢?別著急,下期我們會為您詳細介紹,STELLARIS如何為您實現更多生產力。

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