Sapphire光譜激光成像系統在囊性纖維化跨膜電導調節劑蛋白分析的應用
2020年4月21日，由Tara N. Guhr Lee等在《Journal of Cystic Fibrosis》期刊中發表了《Accumulation and persistence of ivacaftor in airway epithelia with prolonged treatment》的文章，文中使用Azure Sapphire對IRDye 680孵育的印跡膜掃描成像，對CFTR蛋白進行定量分析。
背景：
囊性纖維化（CF）的基本缺陷反映了囊性纖維化跨膜電導調節劑（CFTR）的功能喪失，囊性纖維蛋白是參與氯離子和碳酸氫鹽跨細胞膜轉運的質膜蛋白。CF的一個關鍵治療方法是CFTR調節劑，即用于改善異常CFTR功能的藥物。
CFTR調節劑的當前劑量策略基于血清藥代動力學，但靶組織（如氣道上皮）中的藥物濃度尚不清楚。先前的數據表明，CFTR調節劑可能在氣道上皮中積聚，血清藥代動力學可能無法準確預測慢性治療的效果。
方法：
在治療和沖洗階段的各個時間間隔，通過質譜法測量藥物濃度，在Ussings室中評估電生理功能，并通過Western印跡定量成熟的CFTR蛋白。
結果：
與lumacaftor或tezacaftor相比，CF-HBEs中ivacaftor的累積程度要大得多，并且在沖洗14天后仍然持續升高。CFTR活性在治療7天達到峰值，但隨著ivacaftor的進一步積累而降低，盡管沖洗后仍保持在基線以上。
結論：
慢性治療期間和之后，CFTR調節劑的細胞內累積和持續存在提示氣道上皮內復雜的藥代動力學和藥效學特性不能由血清藥代動力學預測�？赡苄枰苯訙y量靶組織中的藥物以優化劑量策略，并且治療停止后CFTR調節劑的持續存在對個性化藥物治療方法具有重要意義。
Sapphire 雙模式多光譜激光成像系統可完成NIR和RGB熒光，化學發光和磷屏成像等多種檢測。無論您的實驗室進行哪種成像，例如普通的Western Blot、Southern印跡、2D和2D DIGE、可視化組織或小型模式動物成像都可高質量實現。
