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輕松解決細(xì)胞增殖的檢測(cè)方法

瀏覽次數(shù):1850 發(fā)布日期:2020-1-10  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

無論單細(xì)胞還是多細(xì)胞都是以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,進(jìn)行增殖,用來補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞。

 

細(xì)胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU檢測(cè)方法是最新的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。

 

①試劑盒檢測(cè)細(xì)胞代謝活性(基于mtt、cck-8等)

 

mtt(噻唑藍(lán)):通過添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定。活細(xì)胞能將四咪唑鹽(如mtt、xtt、wst-1)還原成藍(lán)紫色的甲瓚或甲瓚鹽(formazan),可通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。

 

ScienCell MTT檢測(cè)試劑盒


MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲臜,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì).

 

cell counting kit╟8 (cck-8)中的wst-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲舎染料能夠溶解在組織培養(yǎng) 基中,生成的甲舎量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。


dna的合成的檢測(cè)(基于brdu的免疫法或edu的點(diǎn)擊化學(xué)法),可通過體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。

 

dna的新組裝合成是細(xì)胞生長(zhǎng)的必要條件,故經(jīng)常被用來進(jìn)行細(xì)胞增殖、細(xì)胞活力及凋亡的檢測(cè)。brdu及edu,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,能摻入增殖細(xì)胞的dna中,可通過對(duì)brdu及edu的檢測(cè),從而對(duì)dna的合 成量進(jìn)行測(cè)定。

     

 edu(5-ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(t)滲 入正在復(fù)制的dna分子中,通過基于edu與apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞dna復(fù)制活性,適用于細(xì) 胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、dna修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行sirna、mirna、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。

發(fā)布者:上海中喬新舟生物科技有限公司
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標(biāo)簽: 細(xì)胞增殖
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