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怎樣選擇適合實驗需要的抗體

瀏覽次數:3945 發布日期:2019-8-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
今天小編教您怎樣選擇適合你實驗需要的抗體
1. 一抗選擇要點
(1)確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。
(2)確定你的實驗類型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經驗證過適用于何種實驗的類型,如果抗體說明 書沒有提及的應用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經過此種實驗驗證,請根據說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的 抗體。
(3)確定實驗樣本的種屬,Human,Mouse,還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種物種實驗,請根據說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗的抗體。
(4)樣本蛋白的結構性質。了解樣本蛋白的結構性質有助于選擇zui合適的抗體,待測樣本蛋白的結構域和樣本在提取和處理過程中是否會變性,蛋白空間構象的改變,會影響抗體的免疫親和反應。

(5)單多克隆抗體的選擇。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現非特異性染色(可以通過封閉等避免)。

2. 二抗選擇要點
(1)種屬來源。主要根據一抗種屬來源來決定購買二抗來源,如一抗是小鼠來源,那二抗就買抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)標記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標記的二抗,以與后面的SP結合反應,而免疫熒光染色就需要購買不同熒光素標記的二抗,如羅丹明、FITC、Cy3等常用熒光素。
 
發布者:上海一研生物科技有限公司
聯系電話:021-69985186
E-mail:3004979817@qq.com

標簽: 抗體
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