NMT和激光共聚焦技術的比較

什么是激光共聚焦

激光掃描共聚焦熒光顯微鏡（laser scanning confocal microscopy, LSCM）是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數據、目前最先進的分子細胞生物學的分析儀器。                   

主要用于觀察活細胞結構及特定分子、離子的生物學變化，定量分析，以及實時定量測定等。其不僅可以得到非常清晰的熒光圖像，進行多重熒光標記的定位和定量分析，還具有圖像三維重建、熒光共振能量轉移譜測定，甚至膜電位測定等功能，成為生命科學研究的重要技術手段。

激光共聚焦的局限

隨著激光共聚焦技術應用范圍的擴大，其在研究中的局限性也逐漸突顯。

激光共聚焦技術主要采集的是生物樣品內部的離子分子信息，這些離子分子信息的改變既可能源于樣品內部離子/分子源的變化，也可能源于樣品內外的離子/分子交換。這兩種離子/分子變化過程是由完全不同的生命機制引發的。

這要求研究者必須通過其它實驗結果，才能得出相對準確的結論。若單純用激光共聚焦數據作為檢測或診斷標準，往往面臨較大的假陽性風險。

NMT對比激光共聚焦

共同點

• 實時

• 動態

• 數據可視化

• 測定游離的離子

差異

激光共聚焦技術	非損傷微測技術
使用染料和激光光源	使用電極或者傳感器
需要標記	無需標記
熒光易發生淬滅	電極或者傳感器穩定
測量時間短	測量時間可短，可長
半活體（有損傷）	近似活體或者完全活體（測定無損傷）
檢測內部的離子濃度變化	檢測跨膜的離子流速以及外部的離子濃度
測定種類較少，依賴于染料	測定種類多，可測Na+，K+，NO3-，O2等
測量材料不能太大，以細胞為主	測量材料不限，從細胞到整體都可以測量
只能同時測定一種離子	可以同時測定兩種離子

 

NMT可測樣品種類繁多

 

NMT可以同時測定兩種離子

結合

將激光共聚焦技術與非損傷微測技術(NMT)的結合，可以克服單純用激光共聚焦數據作為檢測或診斷標準面臨較大的假陽性風險，實現全面獲得被測樣品內外的離子/分子流動信息。實現內外兼測。