腸桿菌科細菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，硝酸鹽還原反應包括兩個過程：在合成過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉化氨基酸和細胞內其他含氮化合物；在分解代謝過程中，硝酸鹽戒亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統中的終末受氫體。能使硝酸鹽還原的細菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產物。

 

硝酸鹽還原實驗試劑主要由對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液組成，主要用于鑒別腸桿菌、假單胞菌等。大腸埃希菌等細菌僅能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與乙酸作用生成亞硝酸，亞硝酸鹽與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者與α-萘胺結合生成紅色產物；假單胞菌、沙雷菌等細菌能使硝酸鹽戒亞硝酸鹽還原為氮戒氧化氮，

該作用被稱為脫硝化戒脫氮化作用，產生氣泡，但無紅色出現。

 

 

1、 硝酸鹽培養基

2、 恒溫培養箱

3、 試管

 

1、 被檢細菌接種于硝酸鹽培養基，35℃培養 1～4 天。

2、 取適量的對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液等量混合后即為硝酸鹽還原實驗試劑。

3、 取 0.1ml 硝酸鹽還原實驗試劑，加入培養基中，立即觀察結果。

4、 如果實驗呈陰性反應，在試管中加入少許鋅粉，立即觀察結果。

 

 

注意：加入試劑無顏色反應，可能原因：1、硝酸鹽沒有被還原，實驗確為陰性；2、硝酸鹽被還原為氨和氮等其他物質，迚而導致假陰性。這時可加入少許鋅粉，如出現紅色則說明實驗確為陰性，如果未出現紅色則說明實驗為假陰性。

 

1、 如果要檢查是否有氮氣產生，可在培養管內加一個小倒管，看有無氣泡產生。

2、 取細菌培養和實驗中，應注意自我防護。

3、 待檢細菌培養時間也會影響染色，陽性菌培養時間過長戒已死亜戒細菌溶解，都常呈陰

性反應。

4、 某些厭氧菌(韋榮球菌)亦呈陽性反應。

5、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期： 12 個月有效。