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Azure biosystems 如何選擇合適的western Blot成像方法

瀏覽次數:5578 發布日期:2016-6-29  來源:Azure

如何選擇合適的western Blot成像方法

最合適的Western blot實驗方法取決于您期望獲得哪些信息,以下內容將幫助您選擇最佳實驗方法。

化學發光方法

化學發光western blot是相對容易且靈敏度極高的檢測方法,靈敏度可以達到fg級。

分子量差異顯著的蛋白,通過電泳可輕松分離,使用“化學發光”檢測非常方便。

優勢:

劣勢:

靈敏度高

容易,實驗方案熟悉

兼容膠片和數字成像

半定量分析

酶促反應

僅能進行單一信號采集,上樣量控制需要剝離和二次孵育

 

蛋白凝膠電泳:                      

檢測單一蛋白

確定蛋白有無

檢測抗體反應

蛋白純度分析

檢測低豐度蛋白

化學發光,單信號,單蛋白

熒光方法

熒光Western blot使用熒光染料標記的二抗進行檢測,印跡膜上的靶標蛋白濃度與熒光信號強度呈線性關系,實現真實可靠的定量分析。熒光染料發射光譜不同,因此在一張 印跡膜上可實現多重檢測。在無需剝離和二次孵育條件下,進行上樣量質控,分析翻譯后修飾蛋白時尤為適用。

熒光western blot使用 紅外或者可見熒光染料.

優勢:

劣勢:

可進行多重檢測

定量精準度高

熒光近紅外印跡膜可儲存,并可重復成像

靈敏度略低于化學發光方法

膜自發熒光導致背景噪音增加

可見熒光檢測的優勢

當需要同時檢測三個蛋白時,可見熒光顯然是最佳的選擇?梢姛晒饩邆浜芎玫撵`活性,有多種可見熒光染料可供選擇。如果您正在使用可見熒光染料(發射光譜可被區分)進行 其它實驗,很容易將這些染料應用于Western blot實驗中。

熒光檢測方法,可用于:                          

同時檢測多種蛋白

研究翻譯后修飾蛋白

同一印跡膜的上樣量質控

多個泳道歸一化

精確定量 Western實驗

 

多重熒光,多種蛋白

上海潔誠生物科技有限公司 http:///

 

發布者:上海潔誠生物科技有限公司
聯系電話:021-34160958
E-mail:liuchaofei@jc-equip.com

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