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葉綠素測定儀的實驗步驟

瀏覽次數:1201 發布日期:2015-5-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

1.取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,剪碎(去掉中脈),混勻。

2.稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,分別放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10ml,繼續研磨至組織變白。靜置3~5min。

3.取濾紙1張,置漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,過濾到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次,最后連同殘渣一起倒入漏斗中。

4.用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至25ml,搖勻。

5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內。以95%乙醇為空白,在波長665nm、649nm下測定吸光度。 實驗結果計算:

將測定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L),二者之和為總葉綠素的濃度。最后根據下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量:

葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數]/樣品鮮重(或干重)。

發布者:河南云飛科技發展有限公司
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