采用Empower樣品組生成器自動創建色譜方法進行方法驗證
目的
展示采用Empower® 3軟件的樣品組生成器自動創建色譜方法和樣品組方法，并將其用于驗證鹽酸甲氧氯普胺及其有關物質的UPLC®方法。
背景
分析方法的驗證過程非常復雜且要求嚴苛，包含許多費時的步驟。一些驗證步驟涉及數據的采集、審查和處理，以及
驗證結果的計算、批準和最終報告。其中的一項關鍵任務是穩定性測試，該測試研究色譜參數中的細微改變對方法性能的影響，從而確定耐受限值。為了進行每個驗證測試的數據采集，必須精心設計和創建多個色譜方法。然而，手動
設計、創建和驗證這類方法過程繁瑣且容易出錯。
Empower 3樣品組生成器通過定義測試所需變量的范圍，簡化了儀器方法、方法組和樣品組方法的創建過程。通過將這些任務自動化，簡化了色譜方法和樣品序列的生成，同時避免了抄錄錯誤。由于最大限度簡化了繁瑣的任務，實驗室效率和工作效率均獲得了提升。
Empower 3樣品組生成器通過定義測試所需變量的范圍，簡化了儀器方法、方法組和樣品組方法的創建過程。
在本文中，我們展示了如何利用Empower 3樣品組生成器自動創建色譜方法應用于驗證鹽酸甲氧氯普胺及其USP指定有關物質的UPLC方法穩定性測試。
解決方案
采用Empower 3軟件的方法驗證管理器(MVM)驗證了鹽酸甲氧氯普胺及其USP指定有關物質的UPLC方法1。MVM軟件簡化了一個應用中從創建驗證方法到數據采集、審查、分析、批準和報告驗證數據的整個驗證過程。
Empower 3樣品組生成器被用于簡化創建色譜方法時所必需的穩定性測試。針對穩定性，評估以下參數：
■ 柱溫：45 ± 2.0 °C
■ 流速：0.6 ± 0.05 mL/min
■ 波長：270 ± 2 nm
在Empower 3 MVM項目中，我們打開樣品組生成器并加載了如圖1所示的穩定性驗證測試。MVM試驗設計，將8種不同儀器條件導入到了Empower 3樣品組生成器中。
接著，在樣品組生成器中通過以下步驟創建儀器方法、方法組和樣品組方法以運行穩定性試驗：
1.將柱溫、流速和檢測波長因子設定所需值
2.為梯度分離設定所需參數
3.設定空白/標準溶液和平衡時間的要求
4.生成樣品組方法
采用Empower 3樣品組生成器，我們能在不同色譜條件下自動創建儀器方法、方法組和樣品組方法，用于穩定性研究。穩定性測試的樣品組方法(如圖2所示)是根據穩定性驗證測試的實驗計劃設計，對每次運行的空白/標準溶液進樣、實驗名稱和方法組進行了設置。當儀器條件(如流速或柱溫)改變時，則在樣品列之間添加平衡步驟。這些儀器方法都將自動創建到方法組中。
圖2.采用Empower 3樣品組生成器生成的穩定性測試的樣品組方法。
這種自動化的生成步驟讓我們能夠快速開始色譜運行，并且對創建的所有方法的正確性充滿信心。此外，與手動過程相比，創建色譜方法所需的時間縮短了約95%。圖3為穩定性測試采集的色譜數據。
圖3. 根據穩定性實驗設計分離甲氧氯普胺及其USP指定有關物質。
總結
通過Empower 3樣品組生成器，用戶能夠同時自動創建儀器方法、方法組和樣品組方法，以實現色譜運行。自動化結果表明，可消除手動過程中可能產生的抄錄錯誤，同時縮短生成色譜方法所需的時間。因此提高了實驗室效率，繼而提高了生產效能。
任何分析實驗室均可采用Empower 3樣品組生成器，并結合沃特世ACQUITY UPLC®系統廣泛用于自動創建色譜方法(包括方法開發和驗證)。
參考文獻：
1. Maziarz M, McCarthy SM, Wrona M. Increasing Efficiency of Method Validation for Metoclopramide HCl and Related Substances with Empower MVM Software. Waters Application Note, 2014: 720005111en.
